组织学技术 过碘酸Schiff反应（PAS）

过碘酸Schiff反应（PAS）

    ⑴石蜡切片6~8微米。

    ⑵切片脱蜡下行水。

    对照：另一取含糖原切片在淀粉酶液1小时（37℃），水洗。

        淀粉酶1克，蒸馏水100毫升

    ⑶1%过碘酸（高碘酸）水溶液2~5分钟，蒸馏水洗数次。

    ⑷Schiff试剂处理8~10分钟，流水冲洗5~10分钟。

        Schiff试剂：煮沸蒸馏水200毫升，停火，加碱性品红1克，不停搅拌溶解。冷至50℃，加入1N盐酸20毫升，冷至室温（25℃），加偏重亚硫酸钠或钾1克，摇荡，暗处过夜。

        加活性碳2克，充分摇荡数分钟，过滤，滤液呈无色或淡黄色，盛入棕色瓶内，4℃冰箱保存。

    ⑸苏木精浦核，水洗。

    ⑹脱水 ，透明，封片。

    结果：糖原及其它PAS阳性物质呈品红色，淀粉酶处理的切片无色。

Schiff块染显示脱氧核糖核酸（DNA）

    ⑴取大白鼠肝固定于Carnoy液或Helly液18小时（4℃）。Helly 液可有少许沉淀物。

    ⑵1N盐酸水解90~120分钟，换新液。移于55℃温箱水解55分钟。

    ⑶亚硫酸水溶液13~20分钟。

    亚硫酸水：10%无水亚硫酸钠水溶液10毫升，自来水200毫升，1N盐酸溶液10毫升

    ⑷入Schiff试剂4~5小时。

    ⑸亚硫酸水溶液洗16~18小时。

    ⑹70%酒精、80%酒精各2~3小时。95%酒精2小时。无水酒精2次共1小时。

    ⑺二甲苯透明，石蜡包埋，切片4~6微米。

    ⑻切片脱蜡，二甲苯透明，中性树胶封片。

    结果：细胞核内DNA红色。

    对照片：不经1N盐酸水解，直接入⑶~⑹处理，结果阴性。

    核仁染呈红色（含合成rRNA的DNA）。

血细胞多糖高碘酸-Schiff法

    ⑴血液或骨髓涂片用苦味酸无水酒精饱和液或Carnoy液固定3~5分钟；

    ⑵用0.5%高碘酸饱和水溶液氧化5~10分钟；

    ⑶入Schiff试剂（0.1%碱性品红配制）染色30~60分钟；

    ⑷最后用2%甲基绿水溶液复染细胞核。

皮肤-S-S-基过甲酸-Schiff显示法

    ⑴皮肤固定于10%甲醛液48小时以上至半年甚至更长；Bouin 液固定24小时。

    ⑵冰冻切片25微米。

    ⑶蒸馏水洗一次。

    ⑷过甲酸液处理10~20分钟，水洗2~5分钟。

        过甲酸液：98%或85%甲酸40毫升，30%过氧化氢4毫升，浓硫酸0.5毫升。至少存放1小时再用。不超过24小时。保存于冰箱内，越新鲜越好。

    ⑸浸入Schiff试剂30~60分钟。

    ⑹自来水加热至60℃洗5~6分钟 ，每隔3分钟换一次液。（洗涤不充分易褪色）

    ⑺将切片贴于盖玻片上，晾干。

    ⑻脱水，透明，封片。

    结果：皮肤角质层呈红色；毛发（含胱氨酸较多）呈深红色。