上期课程回顾
上一期“复旦大学附属中山医院病理科30周年系列公开课”的课程中,宿杰阿克苏教授带领大家学习了“组织脱水需要注意的问题”,宿杰阿克苏教授介绍了组织脱水的各个环节以及注意事项。
内容摘要
图1:组织脱水相关环节
组织固定:
固定液要足量,应为被固定标本体积的5-10倍;
常规固定液为10%中性福尔马林;
及时固定,小标本4-6小时,大标本18-24小时;
固定液在24小时内不能穿透厚度大于2-3mm的实体组织;
及时按规范剖开标本,让重要的检查部位得到应有的固定。
组织取材:
组织标本在包埋盒中的大小、厚度决定了组织处理所需的时间;
通常将组织块切取成2cm×1.5cm大小,厚度不能超过包埋盒的厚度,以免阻碍组织与液体的交换。如果处理前组织固定不完全,则必须增加补充固定的处理;
最好能将大小标本分开处理;
脱钙后组织充分流水冲洗;
去除组织内的杂物。
组织脱水环节:
合理安排脱水机的使用(大小样本分开脱水)
合理设置脱水程序
合理更换脱水机试剂
脱水机的维护保养
手工脱水
图2:合理安排脱水机的使用(大小样本分开脱水),注意脱水机也应配备不间断电源
合理设置脱水机程序
图3:复旦大学附属中山医院病理科手术样本脱水程序
图4:复旦大学附属中山医院病理科内镜、穿刺样本脱水程序
脱水机使用易出现的错误:选择程序有误、开机前未检查试剂液面、开机前未擦拭探头、脱水篮放置不平稳、擅自更改脱水程序、发生问题时未判断原因即随意处理、运行机器时误操作、使用试剂未及时更换、更换试剂时位置更换错误、更换试剂后未设置全部试剂状态、未在开机前对机器做简单维护、未核对当天标本筐数、开机后未再检查机器运行状态。
手工脱水步骤:
10%中性福尔马林液 | 60分钟-120分钟 | |
水洗 | 5分钟-10分钟 | |
70%乙醇 | 60分钟-120分钟 | |
80%乙醇 | 60分钟-120分钟 | |
95%乙醇Ⅰ | 60分钟-120分钟 | |
95%乙醇Ⅱ | 60分钟-120分钟 | |
无水乙醇Ⅰ | 60分钟-120分钟 | |
无水乙醇Ⅱ | 60分钟-120分钟 | |
二甲苯Ⅰ | 20分钟 | |
二甲苯Ⅱ | 20分钟 | |
石蜡Ⅰ | 60℃ | 30分钟 |
石蜡Ⅱ | 60℃ | 60分钟 |
石蜡Ⅲ | 60℃ | 120分钟 |
表1:手工脱水步骤,注意脱水过程中应定时上下晃动篮筐
10%中性福尔马林液配制(pH值 7.2-7.4):
福尔马林溶液(36%~38%甲醛) | 100ml |
磷酸氢二钠 | 6.5g |
磷酸二氢钠 | 4.0g |
蒸馏水或去离子水 | 900ml |
表2:10%中性福尔马林液配制
小结
认真观察思考工作中发生的问题,目的是防范可能出现的意外,意外的发生大多由平时不注意细节上的操作,积累到最后爆发出来的。
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