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【衡道丨笔记】组织脱水需要注意的问题(附下期直播预告)
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2022.11.19 江苏

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上一期“复旦大学附属中山医院病理科30周年系列公开课”的课程中,宿杰阿克苏教授带领大家学习了组织脱水需要注意的问题”宿杰阿克苏教授介绍了组织脱水的各个环节以及注意事项



内容摘要



图1:组织脱水相关环节

 组织固定:

  • 固定液要足量,应为被固定标本体积的5-10倍;

  • 常规固定液为10%中性福尔马林;

  • 及时固定,小标本4-6小时,大标本18-24小时;

  • 固定液在24小时内不能穿透厚度大于2-3mm的实体组织;

  • 及时按规范剖开标本,让重要的检查部位得到应有的固定。

 组织取材:

  • 组织标本在包埋盒中的大小、厚度决定了组织处理所需的时间;

  • 通常将组织块切取成2cm×1.5cm大小,厚度不能超过包埋盒的厚度,以免阻碍组织与液体的交换。如果处理前组织固定不完全,则必须增加补充固定的处理;

  • 最好能将大小标本分开处理;

  • 脱钙后组织充分流水冲洗;

  • 去除组织内的杂物。

 组织脱水环节:

  • 合理安排脱水机的使用(大小样本分开脱水)

  • 合理设置脱水程序

  • 合理更换脱水机试剂

  • 脱水机的维护保养

  • 手工脱水

图2:合理安排脱水机的使用(大小样本分开脱水),注意脱水机也应配备不间断电源

合理设置脱水机程序

图3:复旦大学附属中山医院病理科手术样本脱水程序

图4:复旦大学附属中山医院病理科内镜、穿刺样本脱水程序

脱水机使用易出现的错误:选择程序有误、开机前未检查试剂液面、开机前未擦拭探头、脱水篮放置不平稳、擅自更改脱水程序、发生问题时未判断原因即随意处理、运行机器时误操作、使用试剂未及时更换、更换试剂时位置更换错误、更换试剂后未设置全部试剂状态、未在开机前对机器做简单维护、未核对当天标本筐数、开机后未再检查机器运行状态。

手工脱水步骤:

10%中性福尔马林液


60分钟-120分钟

水洗


5分钟-10分钟

70%乙醇


60分钟-120分钟

80%乙醇


60分钟-120分钟

95%乙醇Ⅰ


60分钟-120分钟

95%乙醇Ⅱ


60分钟-120分钟

无水乙醇Ⅰ


60分钟-120分钟

无水乙醇Ⅱ


60分钟-120分钟

二甲苯Ⅰ


20分钟

二甲苯Ⅱ


20分钟

石蜡Ⅰ

60℃

30分钟

石蜡Ⅱ

60℃

60分钟

石蜡Ⅲ

60℃

120分钟

表1:手工脱水步骤,注意脱水过程中应定时上下晃动篮筐

10%中性福尔马林液配制(pH值 7.2-7.4):

福尔马林溶液(36%~38%甲醛)

100ml

磷酸氢二钠

6.5g

磷酸二氢钠

4.0g

蒸馏水或去离子水

900ml

表2:10%中性福尔马林液配制

 小结

认真观察思考工作中发生的问题,目的是防范可能出现的意外,意外的发生大多由平时不注意细节上的操作,积累到最后爆发出来的。



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