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2023/02/20
16-1 转录组-1.背景介绍(00:41:42)
- 00:26:23 - 普通转录组测序流程 质量控制 RIN值
- 00:36:00 - 上机测序原理,教学视频播放,提问
16-2 转录组-2.准备工作(00:11:53)
- 00:01:00 - 测序原理(SBS),Flowcell介绍
16-3 转录组-2.准备工作-1(00:34:20)
- 00:00:20 - 继续测序原理 ,桥式PCR,单端测序与双端测序
- 00:15:30 - Linux语句复习(文件查看、文件查找相关命令)
- 00:26:36 - 项目目录管理示例&演示,配套练习1
16-4 转录组-3.fastq介绍(01:11:06)
- 00:01:35 - FASTQ数据介绍 使用airway数据集为示例
- 00:15:30 - 软链接数据,fastq格式(4行)
- 00:34:20 - Phred实际例子(测序数据报告),布置课后练习1-2,练习答疑
2023/02/21
17-1 转录组-4.原始数据qc(00:52:27)
- 00:00:10 - 学员准备,讲解习题1 4-5题,描述测量了多少数据量
- 00:18:19 - 数据质量评估,fastqc软件
- 00:23:39 - 脚本后台运行 nohup & 如何写日志文件
- 00:47:51 - 数据质控报告-base sequence quality,布置思考题
17-2 转录组-5.数据过滤1(00:58:06)
- 00:00:30 - 质控报告-pre tile sequence quality
- 00:04:33 - per sequence quality score
- 00:07:53 - per base sequence content
- 00:10:33 - per sequence GC content
- 00:13:13 - per base N content / sequence length distribution
- 00:15:23 - sequence duplication levels/ overrepresented sequence......
- 00:24:37 - 低质量过滤(过滤条件)trim_galore,代码演示
- 00:45:53 - 任务管理(任务投递、终止任务、任务查看)
17-3 转录组-6.数据过滤2(00:47:51)
- 00:01:37 - 过滤软件2-fastp,代码演示
2023/02/23
18-1 转录组-7.参考基因组介绍(00:56:44)
- 00:01:36 - 参考基因组准备 fasta gff/gtf Ensembl
- 00:52:23 - Ensembl基因组数据库ID
- 00:55:59 - 布置习题fastq转fasta
18-2 转录组-8.数据比对(00:51:17)
- 00:03:16 - 数据比对(建索引、比对参考基因组、sam转bam)
- 00:09:19 - Hisat2主要参数,构建索引,代码演示
- 00:20:29 - sam转bam演示,多样本演示
- 00:34:10 - 比对结果文件 sam/bam讲解
18-3 转录组-9.定量表达(00:51:32)
- 00:02:19 - subjunc构建索引&代码演示
- 00:10:31 - featureCounts简介
- 00:12:10 - featureCounts常用参数&代码演示
- 00:17:53 - featureCounts结果讲解与课外习题讲解
- 00:29:30 - Salmon,从fastq可快速定量得到表达矩阵
2023/02/24
19-1 转录组-10.样本相关性和重复性检验(01:02:05)
- 00:02:08 - 数据标准化简介,除去测序深度和基因长度
- 00:10:50 - 各种值的使用场合,数据预处理&演示
- 00:27:03 - 样本表达总体分布,箱式图、小提琴图、密度曲线图......
- 00:39:37 - 样本之间的相关性(聚类树、主成分、相关性)
19-2 转录组-11.差异表达分析(00:56:09)
- 00:00:23 - 差异表达分析 degeR包说明书查看&代码演示
- 00:07:48 - 构建对比矩阵,获得DGlist对象 &代码演示
- 00:15:20 - 提取显著差异基因 & 代码演示
- 00:36:50 - 获得gene symbol获得显著差异表达的结果
- 00:40:28 - 传参脚本(R与linux之间的数据传输)
19-3转录组-12.差异结果可视化(00:32:33)
- 00:00:28 - 差异结果可视化-热图代码演示
- 00:19:10 - 讲解课后思考题(从gtf/gff文件中得到ID与symbol的关系)
2023/02/25
20-1转录组-13.功能注释与功能富集分析(01:15:54)
- 00:01:03 - 功能注释:GO数据库、KEGG数据库(通路注释)
- 00:27:31 - 功能富集:over-prsentaion、GSEA与GSVA
- 00:51:15 - 功能富集:GSEA(MsigDB包 GsesVis包)
20-2转录组-14.彩蛋-单细胞基础分析(01:20:52)
- 00:43:49 - 差异表达分析(不同细胞亚群标记基因)&代码操作
- 00:52:12 - 使用marker鉴定细胞类型,大类注释
20-3生信入门结束语(00:09:43)
- 00:00:39 - 曾老师总结 布置习题+资料分享
写在文末
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