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疑惑解决 | 关于“重现 Nature Plant 番茄分支位点鉴定的 BSAseq 分析结果”

前述,我们推了一份教程,《QTLseq数据分析,鼠标点点,复现 Nature Plant 番茄论文结果》,其中详细较少了如何使用 TBtools 的系列插件,在本地笔记本电脑上完成 BSAseq 或 QTLseq 数据分析。从原始测序数据fastq文件开始,到最后的 QTL 位点。
在该教程中,我们基本重现了数据来源论文的分析结果,但也同时发现定位出来的位点与实际位点有偏移,大体原因如下:

其一,使用的参考基因组序列版本不对,查看后,得到确认,所以偏移量直接从 5Mb 缩小到 2Mb

其二,尽管缩小,但仍然存在坐标偏移,于是审视了流程,发现如下

当然,这个事情就这样了。不过我还是不死心,因为你不去确认一下到底是不是使用的数据问题,就会留下这个疑问。于是我直接上了所有数据,花多了两天的计算时间。结果如下
前述只使用一部分数据的结果(混池17:21),位置明显偏移到60Mb+

此处我们使用全部数据的结果(混池35:35),那么到文稿验证的基因位置多了一个关键峰值,大概在 59Mb+ 的位置。

Emmm,完美。所以BSAseq混池的样品,还是要足够多才好。

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