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序列比对小坑-RNA水平的GU配对

前述部分

公众号后台和评论收到数则消息,有不少朋友想知道哪里可以下载到TBtools

这里附上三个链接:

  1. 直接在TBtools使用交流QQ群上下载,群号为:553679029;这个群主要是用于与使用TBtools的朋友们保持互动,交流,希望能更好的完善这一个工具(目前确实没有精力也没有想法发表TBtools),此处可下载到最新版本,更新极其频繁,只要有小bug修复或添加新工具,立马更新。

  2. 在Omicshare论坛上下载,早前已论坛有主题帖,此处可下载到最新的稳定版,当添加的新工具确实比较稳定了,才进行更新,点击跳转Omicshare论坛。此处也恭喜Omicshare获得政府50wRMB经费支持

  3. 在github上下载,此处不定期更新....因为手上课题较多,并没有时间更新。点击跳转github。

今日主题:RNA水平的GU比对小坑

现在更多的时间放在small RNA数据分析上,所以也就要做RNA层面的序列比对(RNA比对到RNA)。

早前,我一直认为,或者可能不少朋友与我一样,认为

RNA比对,虽然其中有U碱基,那么直接转换为T,使用bowtie、bwa等软件比对不就好了?其实不然,主要问题有两点:

  1. 如果直接转换为T,那么GU(GT)直接识别为错配,这样就有可能直接终止比对(基于罚分

  2. 一旦存在GU配对,做序列比对的时候,再进行库序列查询的时候,只能反向互补库序列,不能反向互补查询序列再进行比对,

    举一个例子

# 同样的查询序列# 同样的库序列# 这里不考虑种子区域....# 1. 反向互补 库序列 得到的结果UUUGGUUUCCUCCAAUAUCUCA|||xx|||||||||XX||X|||  0.5*2+1*3 = 4AAAUUAAAGGAGGUAUUAAAGU# 2. 反向互补 查询序列 得到的结果UGAGAUAUUGGAGGAAACCAAA|||x||XX|||||||||XX|||  0.5*1+1*4 = 4.5ACUUUAAUACCUCCUUUAAUUU# 出现了这么一种情况,反向互补查询序列之后,# 原来的 CA错配 被识别为 GU配对# 原来的 GU配对 被识别为 CA错配

结语

今早两位朋友好心提醒这几天提交评优材料...恩,原本我是不想填的,后来我还是看了下通知,也鼓捣了一番,最后发现....延期毕业学生并不能申请。只能呵呵。

课题紧张,就不多扯咯。今日到此,继续鼓捣课题去了。

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