慢病毒体内应用

过去的几十年间，HIV-1依赖的有缺陷的慢病毒已经成为目前应用最广泛的基因转移载体之一。慢病毒是一种含有二倍体正链RNA基因组的包膜病毒。一经感染宿主细胞，该病毒即利用反转录酶将其RNA转录成双链DNA，随后永久的整合到宿主细胞的染色体中。

修饰后的慢病毒已被移除所有的病毒结构基因，仅保留LTR序列和包装信号以用于导入治疗基因，仍然具有细胞感染能力。不过产生新的病毒颗粒所需的病毒基因不复存在。为提高病毒安全性，转移载体3’LTR也存在缺失，保证病毒整合后仍保持“自身灭活”（SIN）。

重组慢病毒最具优势的特征在于能够有效调控基因物质在分裂细胞和不分裂细胞中的转导、整合以及长期表达。先导整合复核体（PIC）能够允许慢病毒通过核孔复合体（NPC）来跨越核膜，提升慢病毒感染非分裂细胞的能力。其他大多数的反转录病毒则需要在有丝分裂期核孔破裂时达到宿主的核染色质。由于大多数的细胞类型在体内被认为是静止的，因此重组慢病毒成为了许多体内应用的选择。再者，与腺病毒不同的是，慢病毒在体内不具有免疫原性。

CD4是与自然的HIV包膜糖蛋白结合的主要受体，因此慢病毒载体的靶向性十分受限。CD4受体仅仅位于免疫细胞的表面。为感染不表达CD4的细胞，载体通过水泡性口炎病毒糖蛋白（VSV-G）假病毒化，VSV-G作为一种棒状病毒包膜蛋白能够与细胞质膜表面广泛存在的磷脂组分而不是某些特异细胞表面受体相结合。这类病毒均具有广泛的宿主细胞范围，包含神经元细胞、淋巴细胞以及巨噬细胞等细胞类型。

而之前，反转录病毒是不能被用于这些细胞类型的。再者，慢病毒载体已被证明能在体内有效转导脑、肝脏、肌肉以及视网膜。

一个慢病毒颗粒通过细胞表面结合进入宿主细胞。释放病毒RNA基因组并反转录合成DNA。随后DNA通过病毒整合酶随机整合到宿主基因组中。

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