1、细胞内的核酸酶有哪几种?各有何特点?
2、反义核酸是什么,反义核酸的特点,反义核酸的优点。
3、如何看待RNA功能的多样性?其核心作用是什么?
4、酶作为生物催化剂与一般催化剂的共性及特性。
5、为什么酶在疏水环境中有利于催化作用。
6、抑制剂的类型
答案解析
1、细胞内的核酸酶有哪几种?各有何特点?
【答案解析】:核酸酶是指所有可以水解核酸的酶,在细胞内催化核酸的降解,以维持核酸(尤其是RNA)的水平与细胞功能相适应。
按照底物不同,核酸酶可以分为DNA酶和RNA酶。脱氧核酶是具有催化功能的DNA分子,一般通过体外筛选得到。核酶是有催化功能的RNA分子,可催化RNA的切割和剪接。作用特点是切割效率低,易被RNase破坏﹔催化的反应包括RNA的转核苷酸反应、水解反应和连接反应(聚合酶活性)依据对底物的作用方式可分为核酸外切酶和核酸内切酶。核酸外切酶仅水解位于
核酸分子链末端的磷酸二酯键,根据其作用的方向又有5'→3'核酸外切酶和3'-→5'核酸外切酶;核酸内切酶作用于链的内部。其中:部分具有严格的序列依赖性,被称为限制性内切酶。
核酸酶在DNA重组技术中是不可缺少的重要工具,尤其是限制性核酸内切酶的应用更是所有基因人工改造的基础。
2、反义核酸是什么,反义核酸的特点,反义核酸的优点。
【答案解析】:反义核酸是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。利用反义核酸特异地封闭某些基因表达,使之低表达或不表达,这种技术即为反义核酸技术
反义RNA是指能和mRNA完全互补的一段小分子RNA或寡聚核苷酸片段,反义DNA是指能与基因DNA双链中的有义链互补结合的短小DNA分子。反义
RNA和反义DNA主要是通过mRNA的翻译和基因DNA的转录而发挥作用:1)
抑制翻译。反义核酸一方面通过与靶mRNA结合形成空间位阻效应,阻止核糖体与mRNA结合,另一方面其与mRNA结合后激活内源性RNase或核酶,降解mRNA;2)抑制转录。反义DNA与基因DNA双螺旋的调控区特异结合形成DNA三聚体,或与DNA编码区结合,终止正在转录的mRNA链延长。此外,反义核酸还可抑制转录后mRNA的加工修饰,如5'端加帽、3'端加尾(poly a)、中间剪接和内部碱基甲基化等,并阻止成熟mRNA由细胞核向细胞浆内运输。
反义核酸作为基因治疗药物之一,与传统药物相比具有诸多优点。1)高度特异性:反义核酸药物通过特异的碱基互补配对作用于靶RNA或DNA,犹如“生物导弹”。2)高生物活性、丰富的信息量;反义核酸是一种携带特定遗传信息的信息体,碱基排列顺序可千变万化,不可穷尽。3)高效性:直接阻止疾病基因的转录和翻译。4)最优化的药物设计:反义核酸技术从本质上是应用基因的天然顺序信息,实际上是最合理的药物设计。5)低毒、安全:反义核酸尚未发现其有显著毒性,尽管其在生物体内的存留时间有长有短,但最终都将被降解消除,这避免了如转基因疗法中外源基因整合到宿主染色体上的危险性。
3、如何看待RNA功能的多样性?其核心作用是什么?
【答案解析】:RNA功能的多样性表现为以下5个方面:
①控制蛋白质的合成,在遗传信息的翻译中起着决定作用。rRNA起装配作用,tRNA起转运和信息转换作用,mRNA起信使和模板作用。
②作用于RNA转录后的加工与修饰,需要各类小RNA和其蛋白质复合物。
③基因表达与细胞功能有重要的的调节作用,如反义RNA。
④生物催化与其他细胞持家功能。如核酶,信号识别体。
⑤在遗传信息的加工与生物进化中有重要作用,RNA 的拼接和编辑可以消除基因突变的危害,增加遗传信息的多样性,促进生物进化。核心功能:作为遗传信息由DNA到蛋白质的中间传递体,对基因表达的信息进行加工和调节
4、酶作为生物催化剂与一般催化剂的共性及特性。(2014年生化B原题)
【答案解析】:酶与一般催化剂的共性:催化热力学允许的化学反应;可以加快化学反应的速度,而不改变反应的平衡点,即不改变反应的平衡常数;在反应前后,酶本身没有结构、性质和数量上的改变,且微量的酶便可发挥巨大的催化作用。
特性有:
(1)酶的作用-一般要求比较温和的条件
(2)酶的催化效率高
(3)酶具有高度特异性
(4)酶的催化活性受到调节和控制
(5)酶可催化某些特殊的化学反应,体内某些物质的合成只能由酶促反应完成
5、为什么酶在疏水环境中有利于催化作用。(2013年生化B原题)
【答案解析】:酶的活性部位多数位于疏水性的裂缝中,化学基团的反应活性和化学反应的速率在非极性介质和水性介质中有明显差别。.当底物分子和酶的活性部位相结合,就被埋在疏水环境中,由于介电常数较低,底物分子与催化基团之间的作用力被明显加强,因此,疏水的微环境大大有利于酶的催化作用。
6、抑制剂的类型(学会比较他们之间的区别,还是要理解记忆!)
【答案解析】:向酶中加入某一物质酶活性上升,称为激活剂;若使酶活性下降,称为抑制剂。抑制剂又可分为可逆性抑制剂和不可逆性抑制剂。
①不可逆性抑制剂
不可逆抑制剂主要与酶共价结合,降低酶活性。共价结合结合紧密,不能用简单透析、超滤等物理方法除去抑制作用。
②可逆性抑制剂
可逆性抑制剂通过非共价键结合,结合力弱,因此既能结合,又易解离,迅速的达到平衡。可逆性抑制剂又分为竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂两大类。
(1)竞争性抑制剂的结构与底物相似,主要与必需基团的结合基团相互结合,
与底物竞争酶,所以称竞争性抑制作用。抑制剂与底物竞争酶的结合位点的能力取决于两者的浓度。如抑制剂浓度恒定,底物浓度低时,抑制作用最为明显。随着底物浓度的增加,酶-底物复合物浓度增加,抑制作用减弱。当底物浓度远远大于抑制剂浓度时,几乎所有的酶均被底物夺取,此时,酶促反应的Vmax不变,但Km值变大。
(2)非竞争性抑制剂与酶活性中心外的位点相结合,不影响酶与底物的结合,
底物也不影响酶与抑制剂结合,底物与抑制剂之间无竞争关系,但底物-酶-抑制剂复合物不能进一步释放出产物,所以称作非竞争性抑制作用,表现为Vmax值减小,而Km值不变。
(3)反竞争性抑制剂仅与酶-底物复合物结合,使中间产物的量下降。这种抑制
作用称为反竞争性抑制作用。
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