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cDNA基因文库的构建

看到很多地方说到基因文库构建,一直没能理解,以为是数据库之类的。现在来探究一下:

基因文库

包括基因组文库和部分基因文库(如cDNA文库)。

将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。

如果这个文库包含了某种生物的所有基因,那么,这种基因文库叫做基因组文库。如果这个文库只包含了某种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库,例如cDNA文库,首先得到mRNA,再反转录得cDNA,形成文库。cDNA文库与基因组文库的区别在于cDNA文库在mRNA拼接过程中已经除去了内含子等成分,便于DNA重组时直接使用。

建立基因文库的作用

建立和使用基因文库是分离基因,特别是分离高等真核生物基因的有效手段。如果一个哺乳动物的基因组是 3×10^9碱基对,直接从细胞中提取并分离出某一特定基因的DNA片段在技术上是很困难的。但是在基因文库中,不同的 DNA片段都分别在不同的克隆中扩增了,只要有该基因的探针存在,则从许多克隆中筛选一个所需的克隆是一项比较简单的工作。此外基因文库中被克隆的DNA都是基因组中各种随机的顺序片段,某些 DNA片段还包括基因外部的邻近的甚至互相跨叠的序列,所以基因文库特别有利于研究天然状态下基因的顺序组织。例如曾从人的基因文库中分离得到含有血红蛋白β链基因的克隆,从中取得该基因的DNA并进行分析,发现人的δ和β链基因是连锁的,二者之间相隔几千个碱基对,而且在它们内部都有两个内含子。

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