肠道是水产养殖动物的主要消化器官,它有四大功能:化学屏障、免疫屏障、物理屏障和生物屏障。当饲料中的蛋白质、脂肪、糖类等营养物质被肠道消化吸收时,饲料中的抗营养因子和霉菌毒素也会损伤肠道粘膜细胞,导致肠道微绒毛脱落,浆膜层和肌肉层变薄,通透性增加,从而使肠道机能、消化吸收能力下降。这些有害物质一旦通过肠道进入血液循环,就会损害动物肝脏,严重时甚至可能导致死亡。因此,保持水生动物肠道屏障的完整性尤为重要。
近年来的研究表明,胆汁酸可以促进肠道的屏障作用。非结合胆汁酸通过自由扩散可穿过革兰氏阴性菌细胞膜进入细胞内,引起细菌应激反应,抑制其增殖[1]。
Sannaiddappa等[2]发现胆汁酸可以改变金黄色葡萄球菌的形态,提高膜通透性,干扰其能量代谢,影响其毒力和定植能力,进而抑制其繁殖。胆汁酸能够增加对致病性大肠杆菌侵染能力[3]。此外,胆汁酸也会影响肠道菌群的组成。当胆管阻塞使胆汁无法进入肠道时,会导致小肠内有害菌过度增殖[4-5]。通过向普通小鼠口服1.25-5.00 mmol/kg体重的胆汁酸,发现肠道中厚壁菌的比例显著增加,而拟杆菌门和变形菌门的比例则显著降低[6-7]。
胆汁酸针对鱼类肠道微生物的研究尚不清楚,为了填补这一空白,山东龙昌集团与中国农业科学院饲料所的周志刚博士团队合作,对胆汁酸在维持加州鲈鱼肠道屏障和改善健康方面的作用进行了一系列研究。结果总结如下:
与对照组相比,处理组BA300显著增加了鱼体的muscin、溶菌酶、抗菌肽、补体1和免疫球蛋白IgM的表达。
与对照组相比,处理组BA300的肠道occludin、claudin和ZO-1基因相对表达量显著上升。occludin、claudin和ZO-1是紧密连接蛋白的主要组成蛋白,其功能是封闭细胞间隙,防止上皮层内外物质自由进出,有效防止肠腔内细菌、毒素等物质的胞旁转运,维持上皮屏障功能的完整性。
与对照组相比,BA300组的抑炎基因(IL-10、TNF-β)显著性上升。
(1)门水平上,加州鲈的优势菌为厚壁菌门、变形菌门、放线菌门;
(2)与对照组相比,BA150组和BA300组的厚壁菌门显著性上升,变形菌门和放线菌门有下降的趋势。
结论:在鲈鱼日粮中添加胆汁酸可显著增强肠道的紧密连接性,并通过直接和间接的方式影响肠道化学屏障、机械屏障、免疫屏障和生物屏障,从而显著改善肠道屏障功能;通过提高加州鲈鱼肠道的非特异性免疫能力,改善肠道菌群,显著促进肠道健康。
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