质粒纯化：无内毒素质粒提取方法大全

研究背景：

内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来。内毒素脂多糖分子由菌体特异性多糖、非特异性核心多糖和脂质 A 三部分构成。脂质 A 是内毒素的主要毒性组分。不同革兰氏阴性细菌的脂质 A 结构基本相似。内毒素对于细胞的生存有影响，特别是进行转染时，会影响转染效率。

来自QIAGEN的EndoFree Plasmid Kits为公认的市面上内毒素含量最低的质粒纯化试剂盒，一起来康康吧！

T EndoFree Plasmid Kits — 超转染级质粒制备

整合在孵育步骤的 EndoFree® Buffer 内毒素去除液将内毒素水平降低到低于 0.1 EU/μg DNA。所有的蛋白质，RNA 成分和其他杂质成分都被阴离子交换树脂柱去除。

图注：内毒素对于转染效率的影响。不同的转染方法进行转染，但仍可清晰看到在很低的内毒素范围内，转染效率即受到很大影响。

选择指南

名称样本起始量产量操作时间规格货号

Endofree plasmid Kit100-250mL(Maxi)500 ug(Maxi)150分钟(Maxi）10T12362

500ml-2.5L(Mega)2.5mg(Mega)220分钟(Mega)5T12381

2.5-5L(Giga)10 mg(Giga)310分钟(Mega)5T12391

转染级纯度质粒 DNA

QIAGEN 阴离子交换树脂提供转染级纯度 DNA，相当于 2 倍氯化铯梯度离心制备纯度。获得的质 粒 DNA 适合各种实验室应用如大多数细胞的转染和较大难度的酶反应。

QIAGEN Plasmid plus Kit — 最快的质粒纯化试剂盒

利用真空方式超快速进行质粒纯化，20 分钟内可纯化 24 个样本。碱裂解步骤后，利用 QIAfilter 无须离心即可澄清裂解液，然后离心柱安置于真空底座上进行 DNA 的结合和洗涤步骤，并用离心机收集最终的质粒 DNA。

QIAGEN Plasmid plus Kit 获得的质粒内毒素水平在 0.1-1 EU/μg

DNA。原因在于：1. 独特的内毒素去除溶液（ETR buffer for Midi/Maxi Kit、CPW buffer for Mega/Giga Kit）。2. 增加了一步洗涤步骤 。低内毒素水平甚至可以适合某些敏感细胞的转染。

Plasmid Kit — 规格最全的质粒纯化试剂盒选择指南上优宁维