NK细胞是固有免疫的一部分,介导对病毒,寄生虫,细菌和肿瘤细胞的反应。 通过其表面受体FcγRIIIA (CD16)参与固有免疫和适应性免疫应答。
一、 NK细胞分化和发育、分型
1、multiple sites for nK-cell development
2、Developmental origin of human natural killer (NK) cells
3、Developmental origin of murine natural killer (NK) cells in the bone marrow (BM)
二、 NK细胞的功能
1、Natural killer (NK) cells in health and disease NK细胞和疾病的关系
2、NK细胞相关的细胞因子功能
3、NK细胞与B细胞、T细胞、DC、巨噬细胞如何作用共同针对肿瘤、病原体
4、NK cells and immune responses to tumour cells
三、 NK细胞的胞内信号通路
1、NK cell receptor
2、NK cell effector signaling pathways
3、Co-stimulatory molecules that regulate NK-cell
四、 NK细胞Workflow
1、NK细胞分选纯化
用途货号产品名称规格
全血分选130-090-875StraightFrom™ Whole Blood CD56 MicroBeads humanKit
阳性分选130-050-401CD56 MicroBeads, human2mL
无柱式分选130-098-185MACSxpress®Whole Blood NK Cell Isolation Kit humanKit
2、NK细胞体外扩增培养
NK细胞活化/扩增试剂盒中,含有负载CD2和CD335(NKp46)抗体的抗生物素MACSiBead TM颗粒,PBMC或分离的NK细胞在该颗粒的存在下可以培养长达20天。
NK细胞刺激扩增结果图
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NK细胞刺激扩增130-094-483NK Cell Activation/Expansion Kit,humanKit
NK细胞培养基130-114-429NK MACS Medium500mL
3、ADCC抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用
抗体通过与靶细胞表面抗原特异性结合,招募如自然杀伤(Natural killer, NK)细胞等效应细胞杀死靶细胞。NK细胞表面表达FcγRIIIa蛋白,是一种抗体Fc区域的受体,能识别并结合抗体的Fc端,从而使NK细胞结合到靶细胞周围。一旦Fc受体与抗体的Fc区域结合,NK细胞就会释放细胞因子和细胞毒性颗粒,进入靶细胞触发细胞凋亡。
4、流式多色分型检测
Panel 1:Functional Analysis of Human Natural Killer Cells
指标荧光克隆号目的
Live DeadAquan/a活性
CD3Apc-Cy7SP34-2排除
CD4Apc-H7SK3
CD14TRI-COLOR(PE-Cy5)TuK4
CD19TRI-COLOR(PE-Cy5)SJ25-C1
CD16Pacific Blue3G8NK细胞
CD56PE-Cy7NCAM16.2
CD107aFITCH4A3脱粒
IFN-γBV7114S.B3功能
TNF-αBV605Mab11
PerforinPEB-D48
Granzyme BPE CF594GB11
CD8BV785RPA-T8
EomesoderminPERCP eflour 710Dan11mag转录因子
CD57APCHCD57分化
Panel 2:Multicolor flow cytometric analysis of NK cells from mouse spleen
激光指标荧光素克隆号
紫激光CD11bVioBlueREA592
Viobility 405/520 Fixable Dye
蓝激光CD335FITCREA815
Anti-KLRG1PEREA1016
CD3PE-Vio615REA606
CD19PE-Vio615REA749
Anti-NK1.1PE-Vio770PK136
红激光CD27APCREA499
CD45APC-Vio770REA737
5、NK相关的细胞因子检测
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