HTRF®技术STING通路全面解决方案

STING信号通路不仅可以识别外源病原菌感染的DNA，而且可以识别自身细胞质中的DNA，诱发各种自身炎症性疾病。通路异常活化与Aicardi-Goutières综合征（AGS）、系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）、婴儿期起病的干扰素基因刺激蛋白相关血管病变（STING-associated vasculopathy with onset in infancy，SAVI）等自身性免疫疾病的发生密切相关。

STING通路被激活后，由临近细胞产生更多的干扰素和相关细胞因子，产生放大信号的作用。随后，被招募的树突状细胞可以产生CD8+阳性的T细胞和其他炎性相关的细胞因子，促进淋巴结中针对肿瘤的特异性T细胞的交叉启动，产生免疫反应并杀死肿瘤细胞。STING可以作为肿瘤治疗中的药物靶点，被一系列的STING激动剂激活，包括：环状二核苷酸衍生物（CDNs），小分子药物，有机聚合物及金属离子。此外，STING激动剂在肿瘤的联合治疗中能够显著地增强抗肿瘤治疗的效果。

图1：STING通路解析

2022年4月11日，刘海鹏/陈昶/费义艳教授合作在EMBO Rports上发表题为CDK inhibitor Palbociclib targets STING to alleviate autoinflammation的研究成果。

图2：EMBO Rports文献

该研究通过高通量筛选，发现临床上使用的周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinases, CDKs）4/6的抑制剂帕博西尼（Palbociclib）是STING的一种新型抑制剂，其可以直接靶向STING Y167，通过阻断STING二聚化这一独特机制抑制其活化过程。该研究发现了抗癌药物帕博西尼的全新靶点，并为帕博西尼及其类似物快速应用于STING驱动的自身免疫性疾病的临床治疗提供了新型候选药物，同时为基于帕博西尼进一步优化和开发新型STING抑制剂奠定了基础。

HTRF技术提供了基于生化水平初步筛选和细胞水平功能性验证的方法，深入研究STING通路。

生化水平筛选

基于HTRF技术的竞争模型检测原理，使用d2标记STING ligand，Tb标记6His STING WT的抗体，。加入的化合物与标记为d2的STING WT ligand 竞争，从而阻断FRET。特异性信号与化合物浓度成反比。

图3：STING binding Assay 原理

如下图所示，针对mouse STING的DMXAA化合物（紫色三角形），不与human STING ligand竞争结合。STING binding kit表现出高特异性，适合作为高通量筛选。

图4：STING binding Assay特异性结果

HTRF技术提供human和mouse STING相关的生化筛选试剂盒。

相关产品推荐

HTRF STING Pathway Cytokine Assay

货号产品名称规格

62HIFNBPEGHTRF human IFN beta kit500 tests

62HTNFAPEGHuman TNF alpha kit500 tests

62HIL06PEGHuman IL6 kit500 tests

62HIL1BPEGHuman IL1 beta kit500 tests

62MIFNBPEGMouse IFN beta kit500 tests

62MTNFAPEGMouse TNF alpha kit500 tests

62MIL06PEGMouse IL6 kit500 tests

62MIL1BPEGMouse IL1 beta kit500 tests

AlphaLISA STING Pathway Cytokine Assay

货号产品名称规格

AL220Human IL-1β500 tests

AL223Human IL-6500 tests

AL208Human TNF-α500 tests

AL504IL-6 (mouse)500 tests

AL503IL-1β (mouse)500 tests

AL3133IFN-β (human)500 tests

优宁维提供更多AlphaLISA和HTRF技术50多种细胞因子检测试剂盒以及80多种磷酸白蛋白和总蛋白检测试剂盒。

均相技术需要使用搭载有相应模块的酶标仪进行读值，优宁维推荐PE VICTOR Nivo™多功能酶标仪：

VICTOR Nivo™多功能酶标仪配置六种检测模式：分别是荧光强度、化学发光、吸光度（紫外线和可见光)、时间分辨荧光、荧光偏振、Alpha；同时模块化设计可选配分液器，自动进板系统和气体控制选件；并且为长时程细胞检测等需要临界温度的检测提供了温度控制功能（最高65度）

广泛应用于核酸/蛋白定量、ELISA、酶活动力学、GPCR、激酶检测、离子通道、线粒体膜电位、表观遗传学分析、分子相互作用、结合分析、凝集反应、报告基因检测、BRET测定、细胞活力、细胞增殖、细胞凋亡、细胞毒性、细胞膜的完整性和膜的溶解、细菌粘附、细菌鉴定、食品毒素、环境内分泌干扰物、激素检测等几乎所有涉及微孔板的实验与检测。

体积小巧，放置于密闭操作空间内

VICTOR Nivo™的核心光路是一个旋转32位滤光片转轮。完全配置之后，系统可检测大量染料，且比光栅系统具有更好的灵敏度和更大范围的高信价比。具有以下特点：

·内圈及外圈转轮间可互换

·可任意用于激发或发射光路

·滤光片被锁在转轮中，不易丢失

·专用激光光源Alpha模块，仅需数分钟即可完成96和384孔板检测，同时还能够保持很高的信噪比，VICTORNivo™使几乎所有实验室都能够实现快速、高灵敏度的Alpha检测技术。

·对于长时间动力学检测的活细胞实验，为保证细胞活力及健康程度，您可以配置整合型温控模块（温度可高达65℃）和气体控制模块。而且，您可以通过控制O2以适用于厌氧实验。该读板仪提供所有模式下的顶读&底读功能。底读模式常适用于贴壁细胞检测，其创新性光路设计更保证了底读检测的突出性能。

·当与载板架系统结合时，VICTORNivo™可以快速连续读取20块微孔板，您可通过设置无人值守自动化进板流程。

·对于在加样前后需要直接检测的实验，如闪光型化学发光快速动力学检测，您可以选配加样器模块。这种双注射器加样装置，可以检测萤光素酶双报告基因实验，如我们的Twinlite技术。可根据实验需要在每孔内加入小体积样品，随后同时进行检测。该系统非常方便进行初始化、清洗及维护，并且在自动加样以之前会自动检测孔板是否已放置到仪器内，以防止加样造成的系统污染。

·增强安全性软件提供技术控制和功能，为用户操作提供访问级别、数据安全性和全面的审核跟踪，进而为21CFRPart 11合规提供支持。也可与MyAssaysDesktop增强安全性数据分析软件实现无缝整合，确保数据完整性。

本站仅提供存储服务，所有内容均由用户发布，如发现有害或侵权内容，请点击举报。