你以为测序质控合格就结束了吗?
错!
要拿到一条合格的细菌基因组,你还需要再达到以下几个指标
一、Contig数(>1000bp)
该指标是指拼接后所得到的大于1000bp的片段数量。
Contig数越少,代表基因组越完整。Contig数越多,代表组装所得的基因组越零散。
一个质量较好的细菌基因组Contig数应小于100。
如最终得到1条完整的染色体,即contig=1时,则最佳,代表获得了细菌完成图。
二、参考基因组覆盖度
对于细菌重测序,需评估该指标。该指标是指将测序结果与参考基因组比对后所得的coverage。
建议覆盖度>=95%
如低于该值,考虑是否有大片段插入缺失 或 测序质量问题。
三、N's per 100 kbp
该指标是指每100kb碱基中所含有的不确定碱基数,该指标越高,代表拼接结果越差。
四、Total Length
对于细菌重测序,需评估该指标。
该指标是指拼接后所得的所有片段的总长度。
如与参考基因组的总长度有20%以上的差异,需考虑是否有大片段插入缺失 或 测序质量问题。
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