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10X单细胞RNA-seq技术

    10X Chromium单细胞基因表达解决方案提供了一个全面且可扩展的解决方案,能够对数百个至数万个细胞进行细胞鉴定和基因表达分析。10X Chromium能够从每个细胞中检测到更多的独特转录本,有了Feature Barcoding技术,还能从每一个细胞中获得更完整的分子结果,从而鉴定CRISPR介导的细胞特异性扰动,或在同一细胞中同时测定基因表达和细胞表面蛋白表达,并在其他更多的细胞特征类型上更是有着几乎无限可能。

超越传统的基因表达分析,提升到在单细胞的基础上鉴定细胞群体、细胞类型、细胞状态等。从评估肿瘤异质性和干细胞组成,到剖析神经元群体,Chromium单细胞基因表达解决方案带来的技术进步以及一体化的软件工具,能够从单细胞中生成高复杂度的文库,从而实现在多种类型的样品中获得最大量的信息。10X Chromium能应用到如下这些方向。

  • 鉴定和描绘罕见的细胞类型

  • 分析和了解细胞异质性以及它们对生物系统的贡献

  • 利用单细胞RNA-seq开展细胞表型分析,鉴定新的靶点、生物标志物、细胞类型和状态,而无需预先选择靶点

  • 评估同一细胞中的mRNA和细胞表面蛋白表达

  • 对数万个细胞同时开展高通量、高分辨率的功能性遗传筛选

  • 全面评估单独的CRISPR扰动后的基因表达表型

    10X Chromium起源自Drop-Seq技术, 横向孔道逐个导入凝胶微珠Gel beads,第一个纵向道输入细胞。当凝胶微珠和细胞碰撞会被吸附在微珠上,然后通过微流控技术运送到第二个纵向通道(“油管”)。这时就会形成一个个的油滴GEMs(一个油滴包含一个凝胶微珠和一个单细胞),然后收集在EP管中。每一个凝胶微珠都布满了带有不同Barcode和UMI的oligo,oligo的末尾是PolyT,这样就形成了像“刺猬”一样的捕获抓手。随后细胞裂解,这些抓手通过PolyT与mRNA3'端的 poly(A) 碱基互补配对,从而抓取mRNA,构建转录文库。10X Chromium可以在8分钟内完成100~80,000个细胞的捕获。

下面这个视频中有具体的原理和过程介绍

更多关于10X genomics的介绍可以戳这里10x Genomics

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