目前,对于养虾来说,弧菌是最严重的威胁之一。许多种类弧菌可以在许多水体中找到,例如:河流、河口、海洋。在对虾养殖中,由于细菌引起的疾病很多,特别是急性胰腺坏死(AHPND)的爆发,养殖户的损失很大。
AHPND造成养殖虾的巨大生产损失
一、AHPND是对虾养殖中,最危险的疾病。
急性肝胰腺坏死病 (AHPND) 或早期死亡综合征 (EMS) ,已成为全球养虾业面临的最危险威胁之一。据相关报道,AHPND在2010年至2017年期间给中国、马来西亚、墨西哥、泰国和越南的虾养殖业造成了440亿美元的损失。NTTS I(越南水产养殖研究1所)2016年的研究表明该疾病出现在斑节对虾和南美白对虾身上,并多发生在20-45日龄的虾中,死亡率高达100%。副溶血性弧菌认为是该病的主要原因,但哈维弧菌ATCC BAA-1116也能引起该病。
AHPND最常见的治疗方法是抗生素,四环素、土霉素、喹诺酮类药物、甲氧苄啶、强效磺胺类药物、恶唑酸和沙拉沙星是首选抗生素。然而,过度使用这些抗生素有导致耐药性的风险,或者可能会在对虾中留下残留物。许多研究证明,一些更安全、更环保的措施非常有效,被推荐用于虾病预防。其中,使用植物提取物一个新方向,对于水产养殖制药企业来说,仍有很大的潜力可以挖掘。
二、一项关于AHPND的最新研究
最近,圣托马斯大学(菲律宾)的一项研究发现,使用蒌叶提取物(Piper betle L.)可以抑制哈维弧菌导致南美白对虾引起AHPND和发光病。蒌叶通常生长在亚洲的热带国家,如:印度、中国、越南。蒌叶不仅可直接用于咀嚼,还具有抗氧化、抗炎、抗风寒、抗癌、抗菌等功效。此外,叶子含有富含丁香酚(1%-3%)的精油,是制造药物、兴奋剂、防腐剂、滋补剂和其他强身健体配方的来源。蒌叶还含有chavibetol、石竹烯和甲基丁子香酚,它们是制备阿育吠陀药物和草药产品的有效来源。
它的致病活性是基于生物膜形成的机制,也是细菌细胞-细胞接触或者称为群体感应 (QS) 的结果。群体感应(QS)是“细菌的交流语言”的一种形式,可以通过信号载体进行交流和信息协作。QS系统所研究的病原菌大多表明QS与病原菌的致病基因或毒力有关。QS作用机制的结果是将毒力编码基因/信号分子扩散到邻近的细菌,从而使含有毒力基因细菌的密度增大到足以对宿主造成伤害。同时,细菌菌株在接收毒性编码基因信号后,将经历分娩过程,以增加数量。
在这项研究中,菲律宾科学家使用乙醇提取物和蒌叶提取物,抑制菌株哈维弧菌VH0、VH1和BAA-1116的生物膜形成,而不会抑制宿主的生长。而且,共聚焦激光扫描显微镜显示,当用蒌叶提取物进行测试时,细菌生物膜的形态更薄。此外,这蒌叶提取物还显着抑制了QS参考菌株V. harveyi BAA-1116 中的生物发光,并被发现通过调节活性来干扰QS,在表型和基因表达分析中观察到的信号分子(自诱导剂)。
研究表明, 蒌叶可以抑制作用哈维弧菌对白对虾引起的AHPND和发光病
三、研究试验数据和结果
在接下来的实验中,在盐度为15ppt的300L水箱中养殖南美白对虾虾苗。虾每天喂食20%体重的饲料,饲料中添加浓度为1mL/g 的蒌叶乙醇提取物。试验时间为14天,且分为两个实验阶段。第1阶段持续7天,饲喂2种饲料,包括:对照组 (未补充蒌叶乙醇提取物)、研究组(补充蒌叶乙醇提取物)。
研究注重的是虾的存活率和几个关键生长指标。在接下来的7天进行第2阶段试验,分别将对照组和研究组的虾苗分为两组,分别让其中一组的虾苗感染上哈维弧菌。
结果表明:
1、在第一阶段,蒌叶乙醇提取物组和对照组中,虾的存活率和生长性能几乎没有区别,这说明蒌叶提取物也不影响虾苗的生长性能。
2、第2阶段的结果表明,在感染哈维弧菌的第7天补充蒌叶乙醇提取物组,获得76.67%的存活率,与未感染组 (83.33%) 没有显着差异,但与没有补充蒌叶乙醇提取物的组 (30%) 有显着差异。同时,死虾的肝胰腺组织病理学检查发现细胞小管破裂,与健康虾的正常组织学相比,这是AHPND的病理表现。
因此,本研究结果清楚地表明了,蒌叶乙醇提取物在保护虾免受细菌侵害方面具有明显的作用,尤其在哈维弧菌方面抑制方面。
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