前言:
针对虾的PCR(聚合酶链反应),已成为为对抗各种虾病而不断开发的最新创新之一。
一、聚合酶链反应的类型
1、常规PCR(cPCR):常规PCR是最基本的PCR类型,其中使用特定的引物和DNA聚合酶以指数方式扩增目标DNA片段。最终结果,可以通过琼脂糖凝胶上进行分析,cPCR用于检测引起虾病的病原体的DNA。
PCR用于检查病原体的存在。
2、实时荧光定量PCR(qPCR):qPCR是一种允许在扩增反应过程中实时检测和定量DNA的方法。这种技术非常敏感,可提供实时结果。
3、逆转录PCR (RT-PCR):RT-PCR用于检测和扩增RNA,而不是 DNA。这种类型的虾PCR测试用于检测RNA病毒的病原体,该方法涉及在DNA扩增进行之前,使用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA。
4、隔绝式恒温聚合酶连锁反应PCR(iiPCR):通过iiPCR检测虾病的原理与其他PCR方法相似,但工作方式不同。在iiPCR中,靶基因的扩增发生在恒定的温度下,这与传统的PCR和实时PCR不同,后者在每个重复循环中由三个不同的温度组成。iiPCR过程需要更少的时间,并且可以在iiPCR或PCR Pockit屏幕上定性观察结果。当样品中病毒DNA的信号超过10拷贝时,iiPCR表明阳性结果。
5、数字PCR:数字PCR将样品分成几个小隔室,并在每个隔室中独立扩增DNA。该PCR检测可准确检测和定量单分子靶标。数字PCR具有高灵敏度,适用于目标浓度非常低的样品。
二、PCR检测的好处
1、早期检测:虾PCR检测的主要好处之一是它能够在感染的早期阶段检测疾病,甚至在临床症状出现之前。这使养殖户能够及早采取预防和控制措施,降低疾病传播给池塘中虾群的风险。
2、高精度:PCR虾检测具有较高的特异性和灵敏度。这意味着PCR检测可以准确识别虾样品中的特定病原体,有助于避免假阳性或假阴性结果。
3、识别病原体类型:PCR检测还可以帮助识别导致虾疾病的病原体。这些信息对于设计适当的控制策略非常重要,因为每种病原体可能需要不同的预防和管理方法。
4、疾病传播监测:通过定期对虾进行PCR检测,养殖户可以更好地监测疾病的传播。PCR检测结果有助于养殖户做出隔离和控制感染虾群的决定,以防止疾病进一步传播。
5、优越的养殖选择:PCR检测也可用于对虾虾苗,以获得抗病虾苗。通过进行PCR测试,养殖户可以确保投放的虾苗,对特定病原体具有抗性,从而增加养虾成功的机会。
6、节约成本:虽然虾PCR检测比其他检测方法更昂贵,但早期准确的检测可以节省长期成本,防止未来潜在的损失。
对虾的PCR测试,通常在实验室使用养殖户送来的样品进行。通常,这些样本可以是全虾样本或器官样本,如:肝胰腺、胃和上皮,在虾塘取这些样品时,可以在70-96%酒精中浸泡24小时。
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