“应用牛活体采卵技术需要注意哪些细节？(2)”发表后，正在实施OPU/IVF胚胎生产项目的技术人员及时采纳了该文中的某些行之有效的合理化建议：做活体采卵前先检查供体卵巢上4-8毫米卵泡数量多寡程度来决定是否实施活体采卵；如较多，就及时做活体采卵；如较少，就暂时推后。如此改进后，以前每次活体采卵大约可得8枚左右可培养卵母细胞，现在则提高到15枚左右。本文系“应用牛活体采卵技术需要注意哪些细节？”系列文章最后一篇，内容涉及吸液真空度高低、采卵针内径大小和采卵针针尖斜面长短等因素对高质量卵母细胞回收率的影响。这些因素对OPU高质量卵母细胞回收率的影响西方学者远在25年前即已清楚阐明，此后至今的海量实践数据亦获得无可置疑的印证，以下分述之。 我们以表1说明；表1的18-g、19-g和21-g系针头内径编号，我们也叫18号针头、19号针头和21号针头，其对应内径分别是：0.84毫米、0.69毫米和0.51毫米。从表1可以清楚看出：在吸液真空度为70毫米汞柱，应用18号针头（内径为0.84毫米），吸液流速可达到31.6毫升/分钟，此条件下获得的卵母细胞总回收率、1-2级卵母细胞回收率和囊胚率效果较佳（参见表1黄色区域）。
常用OPU采卵针针尖斜面分为两种：长斜面针尖和短斜面针尖，参见图1。在人医，长斜面针尖针头宜用于肌肉注射和皮下注射；而短斜面针尖针头则用于静脉注射、动脉注射或外周神经封闭。人们担心：使用长斜面针尖采卵针可能会在针尖刺入卵泡瞬间造成卵泡液和卵母细胞漏逸，缘于针尖斜面较长。那么，这两种针尖斜面长短不同的采卵针对卵母细胞回收率、高质量卵母细胞回收率和卵母细胞体外正常发育率（囊胚率）有哪些影响呢？我们以表2和表3说明。从表2和表3的这些数据我们可以大致归纳如下初步结论：
1.在吸液真空度50-130毫米汞柱范围，长斜面针尖采卵针获得的卵母细胞回收率最高。
2.在吸液真空度50-70毫米汞柱范围，长斜面针尖采卵针获得的1-2级卵母细胞回收率较高。
3.总体来说：长斜面针尖采卵针和短斜面采卵针两者获取的卵母细胞，体外培养发育成囊胚的几率基本类同。
4.在吸液真空度50-90毫米汞柱范围，采用18-g至20-g采卵针（内径为0.84-0.58毫米），不论针尖为长斜面或短斜面，均可获得不错的1-2级卵母细胞回收率；但以吸液真空度50-70毫米汞柱效果较佳，参见图3黄色区域。
图1.常用采卵针针尖斜面分为两种：长斜面针尖和短斜面针尖。
（长=长斜面针尖采卵针；短=短斜面针尖采卵针）
表3.吸液真空度和不同采卵针对高质量卵母细胞回收率影响如何？
（长=长斜面针尖采卵针；短=短斜面针尖采卵针）
以上西方学者提供的这些参数和印证资料，尽管不容置疑和非常有价值，同道们目前也只能暂时作为参考，切忌盲从和迷信。国内眼下正在积极引进、消化、吸收和逐步推广OPU/IVF胚胎生产和移植技术（第三代牛辅助繁殖技术），这同40年前我们引进传统胚胎移植技术（第二代牛辅助繁殖技术）情形非常相像，但那场耗时40年的技术引进却最终不了了之，令所有参与者挫败感极强。殷鉴不远，我们需汲取既往教训，专心致志、脚踏实地、认真借鉴发达国家这些参数和印证资料，通过锲而不舍艰辛努力，因地制宜地创造出一套适合中国奶牛/肉牛养殖产业活体采卵流程，藉以确保OPU/IVF胚胎生产和移植技术在国内顺利成功落地，继而产生巨大经济效益。
我们下期论述“如何评估OPU/IVF胚胎质量优劣？(2)”。
▍本文来源：荷斯坦杂志
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