血小板聚集试验中可用的诱导剂有很多，了解其作用原理，对于选择合适的诱导剂及理解检测结果至关重要，本期我们用两个表格来做一详解：
表1 诱导剂的作用原理
诱导剂
工作浓度
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二磷酸腺苷
低剂量：
1.0-5.0uM;
高剂量：
10.0 uM
二磷酸腺苷(ADP)与血小板表面的ADP受体结合，致钙内流和血小板变形，从而促成第一相聚集波。第二相聚集波则反映了血小板贮存颗粒中ADP的释放。
低剂量ADP只诱导第一相聚集，其作用是可逆的。ADP和肾上腺素被认为是弱血小板激动剂。
ADP与两个G蛋白偶联受体：P2Y1和P2Y12结合。ADP与P2Y1受体结合后通过动员钙离子，诱导变形并引发第一相血小板聚集。P2Y12受体被认为是主要的ADP受体，通过抑制腺苷酸环化酶而导致血小板的完全聚集。
P2Y12受体也是氯吡格雷的靶点。而阿司匹林等非甾体抗炎药会抑制ADP诱导的第二相聚集。
胶原
1-4 ug/mL
胶原与GPVI和GPIa/IIa受体结合，诱导颗粒释放、TXA2生成，并参与血小板粘附，然后持续激活GPIIb-IIIa。
在PRP中加入胶原激动剂后可出现滞后期，通常<1分钟。
低浓度可用于检测阿司匹林和其他COX-1抑制剂导致的血小板功能受损。如果低浓度显示聚集性受损，则再使用较高浓度。
瑞斯托霉素
低剂量：
0.5-0.6mg/mL;
高剂量：
1.5-5.0 mg/mL
瑞斯托霉素（通常不是低剂量）主要通过VWF和GPIb-IX-V复合物引起血小板凝集（而不是聚集）。【血小板聚集需要通过GpIIb-IIIa复合物将纤维蛋白原与血小板结合。】
肾上腺素
5-10 uM
肾上腺素与血小板表面的α2肾上腺素能受体结合，导致腺苷酸环化酶的抑制和钙离子的释放。肾上腺素对血小板的聚集作用与ADP相似：首先诱导第一相聚集、继而ADP从血小板致密体释放并促进第二相持续聚集。与ADP一样，阿司匹林和非甾体抗炎药可抑制第二相聚集。肾上腺素被认为是一种弱激动剂。然而，α2肾上腺素能信号转导的缺陷与出血性疾病有关。
由于肾上腺素受体数量的自然变化，一小部分人的血小板并不总是表现出对肾上腺素的完全聚集，但这些人没有血小板缺陷。
花生四烯酸
500ug/mL
花生四烯酸是血小板内血栓素A2[TXA2]的前体。花生四烯酸通过环氧化酶和血栓素合成酶转化为TXA2。TXA2是一种强效血小板聚集诱导剂，可导致颗粒释放及更多TXA2生成，从而持续激活GPIIb-IIIa。
凝血酶
低剂量：
50 nmol/L;
高剂量：
100 nmol/L
凝血酶是血小板最有效的生理活化剂，蛋白酶激活受体1（PAR1）和4（PAR4）被凝血酶激活。PAR1和PAR4是G蛋白偶联受体的7跨膜组的成员，其由N-末端结构域中的单个裂解激活，以产生新的N-末端，其激活G亚基和细胞内信号。
凝血酶在低浓度[50nmol/L]时诱导血小板聚集，但在此剂量下，凝血酶不足以诱导完全聚集而是与血小板结合并诱导其形状改变。在较高浓度（100nmol/L）时，凝血酶可诱导完全聚集。
U46619（TXA2类似物）
1nM
U46619是一种强效且稳定的TXA2激动剂。
表2 典型疾病的血小板聚集试验特征
典型疾病/临床状况
血小板聚集试验特征
血小板无力症/无纤维蛋白原血症
除瑞斯托霉素外，所有激动剂均无聚集或明显受损。瑞斯托霉素诱导的凝集反应可发生，但由于与纤维蛋白原不能结合，不能诱导血小板聚集，因此最大聚集率会低于正常对照（如下图1）。
无纤维蛋白原血症也有类似的结果。
Bernard Soulier综合征或VWD
瑞斯托霉素诱导的血小板凝集缺乏或显著降低。（如下图2）
贮存池病或血小板释放功能缺陷
ADP、肾上腺素和胶原仅能诱发第一相聚集，瑞斯托霉素仅能部分诱导凝集，提示血小板颗粒缺乏或释放障碍。（如下图3）
阿司匹林效应（或COX通路缺陷）
花生四烯酸不能诱导聚集，ADP仅能诱导第一相聚集，胶原不能诱导聚集或聚集率降低。
氯吡格雷
ADP不能诱导聚集
2B型VWD或血小板型VWD
低剂量瑞斯托霉素可诱导聚集。
图1 （蓝色曲线为正常对照）
图2
图3
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