文章开篇想问大家几个问题:生命的本质是什么?你对自身了解么?维持生命活动的机理又是怎样的呢?
这可不是直击灵魂的柏拉图三连问——我是谁?从哪来?到哪去?
我们自然是在科学的角度解答这些问题。
简单来说,生命活动的基础是生物分子间以及生物分子与其它分子间的相互作用。那分子间相互作用分析就是生命科学的基础性技术,当然这仅仅是从分子水平上了解生命现象,阐明生命活动的机理,发现生命的本质,并不代表生命整体,但这对于人类认识和改造自然、了解人类自身、发现致病机制以及治疗途径,都具有非常重要的理论和现实意义。
配体与细胞表面受体:免疫检测点、Car-T等
转录因子与核酸调控序列:启动子、增强子等
蛋白复合体亚基之间的组装与调节:Integrin、铁纳米笼等
酶分子与激活剂/抑制剂
蛋白与小分子化合物
蛋白与抗体
技术 | 不足 |
---|---|
WB | 耗时费力、操作繁琐 |
Elisa | 需要标记 |
酵母双杂 | 终点技术 |
CoIP | 周期长、繁琐 |
ChIP | 操作繁琐,技术难度大 |
EMSA | 耗时费力,步骤繁琐 |
荧光共振能量偏移(FRET) | 检测强亲和力的相互作用 |
传统用于鉴定生物大分子间相互作用的技术,具体实验中常因目的蛋白表达量低、抗体灵敏度低等原因而检测不出目的条带,或者因为抗体的特异性不好,而无法判断抗体是否与目的蛋白有结合,同时也极易出现假阳性或者假阴性的结果。
因此,我们不得不提一项极具优势的分子互作检测技术——Biacore
Biacore是基于表面等离子体共振(SPR)技术来实时跟踪生物分子间的相互作用,而不用任何标记物的技术,是被公认的检测分子互作的金标准。
表面等离子共振(SPR)原理
Biacore-动态、实时传感图
· 实时监测,反映分子互作的动态全过程
· 完全活性的分子互作分析
· 无需标记,省时省力
· 芯片类型丰富、齐全,应对多样的样品种类
· 多种研究策略,满足不同领域的应用
· 检测灵敏度高、动态范围广( mM~pM)
· 预设程序模板,全自动进样分析,可靠、准确
· 功能基因组与蛋白质组
· 肿瘤与癌症
· 免疫学
· 神经生物学
· 传染性疾病
· 食品、环境安全监测
· 细胞信号传导
· 蛋白质构效关系
· 新药研发、质控
· 疫苗、抗体药物开发
Biacore系统广泛应用于蛋白-蛋白、蛋白-小肽、蛋白-DNA,蛋白-药物、小肽-噬菌体、SPR-MS等各种生物分子之间相互作用。其应用领域包含生命科学、食品安全、环境检测、生物医学、毒素和抗生素快速检测、蛋白质组学、药物筛选及相关药物动力学实时检测、生物分子特殊肽段及相关偶合分子的检测、病毒及致病分子/蛋白及受体研究、分子识别、免疫调节、免疫测定等,尤其适于在高校、科研院所进行科学研究及教学实验使用。
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亲和力是判定分子间相互作用重要的参数,是了解分子识别及生物学过程、药物的发现与筛选等的重要指标。对于药效的评价、生物大分子及其复合体的稳定性等则需要从动力学、热力学和热稳定性等方面进行全面的研究,它包括分子间的结合、结合的快慢、结合的强弱、结合的机理等方面。
普健生物提供BiacoreTM、MicroCalTM ITC和MicroCalTM DSC三大分子间相互作用分析系统。根据客户不同需求提供各具特色分子间相互作用分析服务,高效、快速、高灵敏度,性价比极高。
普健生物拥有BiacoreTM X100(单通道)和BiacoreTM T200(4通道,384连续进样)两大系统,可以提供优质的动力学检测服务。
信息类型:亲和力、结合动力学、定量、特异性结合活性、稳定性和特异性
普健生物MicroCalTM iTC200等温滴定微量热仪可从热力学的角度研究生物大分子之间的相互作用,提供生物大分子相互作用的热力学机理。
信息类型:结合常数、结合位点数、摩尔结合焓、摩尔结合熵、摩尔恒压热容和动力学参数(如酶活力、酶促反应米氏常数和酶转换数)
差示热量扫描仪(DSC)通过升高或降低温度来诱导高分子的改变,从而测量分子相互作用的热力学变化,是表征分子热稳定性的首选技术。普健生物MicroCal VP-Capillary DSC能为客户快速准确的鉴定出最稳定的蛋白质和生物药物候选物。
信息类型:热稳定性
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