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【科普】乳腺组织冰冻切片是如何制作的?
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2023.02.13 江苏

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术中快速冰冻切片检查是病理科的一项常规工作,但同时又是一项非常重要及高风险的检查。乳腺病变在临床很常见,而其冷冻诊断又极具挑战,切片质量的好坏直接影响病理诊断的准确性,进而影响临床医师对手术方案的选择。

一、首先给大家介绍乳腺冰冻切片的用途:

(1)乳腺冰冻切片可以决定病变良恶性,以确定手术方案

(2)可确定有无前哨淋巴结转移,以决定手术范围

(3)可确定切除肿瘤的切缘有无受累,以决定是否保乳;

但是它也具有一定的局限性:

(1)冰冻切片常可产生冰晶,会给病理诊断医师带来较大的困难

(2)冰冻切片诊断时间短,不能借助免疫组化、分子病理等辅助手段

(3)冰冻切片不适用于较硬组织或脂肪组织

(4)冰冻切片取材通常局限,代表性较差;

二、下面详细介绍一下术中冰冻的制作过程:

1、取材:乳腺离体标本及时送至病理科,保证标本新鲜,取材时务必保持取材台及器械干燥,不可用水冲洗标本。取材大小2cm×2cm×0.3cm,若取材过大或过厚则会延长冷冻时间,容易产生冰晶。取材时应尽量避开钙化和线结,并尽量剔除乳腺周围的脂肪组织。若是保乳手术,取材时应该用染色剂标记边缘。

2、冷冻包埋:将冷冻切片机的温度设定在-25℃ ,取好的组织用滤纸轻轻吸干组织表面的水分及血性液体,放置在冷冻头上及时快速冷冻,以减少冰晶的形成,滴加OCT包埋剂,当观察到包埋剂开始由下向上变白并形成“火山口”外观时,压上冷冻锤加速冷冻5-6秒后取下冷冻锤即可切片。

3、切片:使用专用的一次性冷冻刀片,使刀片的温度和冷冻切片机箱温度一致,以防止切片粘连。放卷板要调节至合适位置并固定好,不要轻易调整角度,以免在切片时耽误时间.

4、固定及染色:冷冻切片贴附于干净的载玻片后应立即放入95%乙醇中固定,1分钟即可。目的是使组织内蛋白质变性、凝固、沉淀,保持组织和细胞原有的形态;不能长时间停留在空气中,易造成细胞退变,染色不佳。然后进行常规HE染色,梯度酒精快速脱水,二甲苯透明,最后封片。

5、诊断:制成的切片马上进行显微镜下观察,良性?恶性?还是非典型增生?淋巴结有没有转移?切缘是不是阴性?等等都需要诊断医师在最短的时间内,根据患者的病史、年龄、影像资料、大体所见,综合判断做出最终诊断,给临床以指导方向。乳腺冰冻切片诊断的准确性要求极高,疑难病例则需要延期诊断,但通常比率不超过5%。

三、跟生命赛跑,与疾病抢夺时间:

在组织标本进入病理科开始到发出报告,整个冰冻过程要求在30分钟内完成,取材及制片必须在15分钟之内完成,留给诊断医师的就只有15分钟的时间!所以,乳腺冰冻切片质量的好坏,直接影响到诊断的速度及准确性。

制作冰冻切片,无论采用何种方法和设备,都要快速把切除的新鲜组织直接冷冻,避免在取材、固定和冷冻时组织里混进水分,以保持组织原来结构,这样对于减少冰晶及使冰晶体积缩小都很有益处,从而提高病理诊断的准确率。

关爱女性、关爱健康,病理科秉承着老一辈妇幼人的嘱托,用我们的精准医疗,为您的生命健康保驾护航!

供稿|病理科 李静

校稿丨健康教育科 王少坤

审核|宣传科

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