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PAS糖原染色

1、概况

PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。

2、原理

PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。

过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。

3、应用

随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ,糖原累积病诊断和研究 ,糖尿病的诊断和研究 ,用于某些肿瘤的诊断等。

除用于糖原的鉴定和黏液的显示外 ,还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色。

4、方法

固定液

Carnoy固定液: 纯

酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 30ml,也

可以选用75%酒精配制

1) 过碘酸酒清夜配法: 过碘酸(HIO .2H O) 0.4g 95%酒精 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml 保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.

2)Schiff氏液: 0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.

3) Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml  1NHCI 0.5ml  纯酒精 23ml

4) 亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml  1NHCI 10ml  蒸馏水 180ml的树胶溶解。

5)哈瑞或迈耶苏木精

染色步骤

1. 石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗)

2. 蒸馏水洗

3. 过碘酸酒清夜10min

4. 自来水冲洗10min

5. Schiff氏液10min

6. 流水冲洗5min

7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化)

8. 流水冲洗5min

9. 常规脱水、透明、封固

结果

PAS阳性为红色,细胞核蓝色。

来源:医学检验圈

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