弹力纤维染色与免疫组化CK双染的应用

弹力纤维染色与免疫组化CK双重染色

随着CT技术的普及与应用，越来越多的早期肺癌被发现，该部分患者的TNM分期在术后的治疗中显得尤为重要，在肺癌中常以肿瘤是否突破脏层胸膜的弹力纤维层作为该肿瘤是否侵及胸膜为依据，以指导TNM分期、临床术后治疗及判断预后，特别是肿瘤直径＜3cm的病例。1988年Hammar^[1] 首先建议用肿瘤是否突破脏层胸膜弹力纤维层作为肿瘤是否侵犯胸膜的依据，之后越来越多的研究表明，弹力纤维染色是一种帮助判断肺癌胸膜侵犯与否的重要病理技术手段^[2]。

弹力纤维在人体分布广泛，主要分布于动脉壁、肺泡壁、胸膜及皮肤等处。在常规HE染色中弹力纤维被染成淡粉红色与胶原纤维难以区分，因此通常选择特殊染色-弹力纤维染色加以区分。弹力纤维染色方法主要有间苯二酚碱性品红法（弹性纤维呈黑色至紫黑色）、地衣红法（弹性纤维呈深棕色）及维多利亚蓝法（弹性纤维呈蓝色）等。

弹力纤维主要含有丰富的二硫键糖蛋白，强嗜酸性易与染色液中的碱基结合而被染色。细胞角蛋白是细胞骨架中间丝蛋白家族的一大亚类，对肿瘤的诊断、评价药物的疗效、判断预后都有重要意义。广谱型细胞角蛋白（CK）标记大部分上皮细胞，主要标记角化上皮、单层上皮、复层上皮等，在免疫组织化学中染色为棕黄色。为了在染色后弹力纤维与CK颜色对比清晰，利于诊断，故通常选择维多利亚蓝法与免疫组化CK双染。

肺的脏层胸膜有两层弹力纤维层，研究表明肿瘤突破贴近肺实质的内在弹力纤维层与突破间皮下的外层弹力纤维层两组患者的生存时间没有差异^[3]。我们在实际工作中，通过采用免疫组织化学CK染色后再行染弹力纤维染色的方法，能够客观、准确的识别弹力纤维与癌组织之间的关系，阅片难度小，并且操作简单。举例如下：

图1  红色箭头为维多利亚蓝染色后的动脉血管壁

图2  红色箭头为经维多利亚蓝染色后的胸膜弹力纤维，黄色箭头为免疫组化CK阳性的肿瘤细胞

参考文献

[1] Hammar S P . Common Neoplasms[M]// Pulmonary Pathology. Springer New York, 1994.

[2] 孔洁, 张伟, 季琳,等. 免疫组织化学细胞角蛋白与弹力纤维双重染色在评估肺癌侵犯胸膜中的应用[J]. 中华病理学杂志, 2015, 44(009):659-660.

[3] Warth A , Muley T , Herpel E , et al. A Histochemical Approach to the Diagnosis of Visceral Pleural Infiltration by Non-small Cell Lung Cancer[J]. Pathology & Oncology Research, 2010, 16(1):119-123.

作者 金丹   沈阳医学院附属中心医院病理科

编辑及校对  远方 张君杰  2020年8月10日