连载的前面十一篇文章,错过的可以在本公众号查看历史消息,建议有耐心的兔友们看完,小编承认是有点复杂,我努力用最通俗的表达方式来叙述吧。
本系列连载是小编多年来查阅大量国内外关于兔球虫病的资料,通过自己的理解,再用比较简单的语言叙述出来,不代表权威,只代表我个人的理解,仅供参考。希望起到抛砖引玉的效果。欢迎专家或者同仁批评指正。
规模兔场强烈建议购置一台显微镜,兔场都修得起,买一台显微镜算什么?
我们做镜检分为以下几种方式:
1、压片
有一种做法是取胆管或者肠粘膜结节作压片镜检,可以看到裂殖子、裂殖体、配子体,卵囊等不同发育阶段的虫体。
实践中这个压片意义不大,实验室学习倒是有必要,在此就不做介绍。因为如果肉眼能够看到这个结节不做镜检也知道是球虫。
2、飘浮法检测和计数:
由于这个操作对新手而言有点抽象,受设备的限制,也受文字描述不生动具体的限制,下一步再专门写,看怎么才能表达清楚。或者用视频表达,或者现场示范眼见为实。
3、软粪和稀粪直接镜检:
这很简单,但是,可靠性有限,对新手来说,可以作为学习球虫镜检的一个入门台阶。
这里就重点介绍软粪和稀粪的镜检吧。
粪便直检的目的是,看看粪便里面是否存在球虫卵囊,以确定兔子是否带有球虫。
当然这里说的粪便直检的缺点也是明显的,首先这种操作具有偶然性,无法计数,结果只可参考,不可作为确诊依据。
粪便直检的结果差异很大,与取样的不均有关,与标本涂抹厚薄有关,与显微镜视野区域有限有关。
比如,标本(软粪或者稀粪)在载玻片上抹厚点,看到的球虫卵囊就多,抹薄点,当然球虫卵囊个数就少。
当然,有时候明明该兔子很严重的球虫病,偏偏你取的这粒粪便没有球虫卵囊,那就会得出错误的结果,或者恰好你抹片这个位置的粪便球虫卵囊极少,结果也不准确。
粪便直检的最低配置,显微镜调到100倍就可以观察到球虫卵囊,通常在160倍观察。如果需要对球虫卵囊计数,则应该在100倍条件下做镜检。
如果要想看清楚球虫卵囊有没有孢子化,则建议把显微镜调到400倍。但是很多显微镜在400倍的时候,物镜可能抵住载玻片了,容易污染镜头。
操作方法:
1、取新鲜兔粪,新鲜兔粪方便在显微镜下确认,新排出的球虫卵囊内充满液体,充盈饱满,在显微镜视野里容易识别,如果放置时间过长,球虫卵囊就有可能失水而不方便确认。
2、在0.17毫米厚度的载玻片上(一般载玻片),滴一滴甘油,滴一滴清水,在载玻片上用滴管抹匀,使之成为甘油和清水的等份液,然后抽去一些液体,使载玻片上甘油清水液体略有残留。
3、也可以忽略步骤2,在载玻片下面放一张有小字的纸片,直接用粪便在载玻片上轻轻涂抹,厚度以透过标本能够看清楚载玻片下面纸片的小字为宜。
4、调节显微镜的光照强度,聚光镜位置,粗焦,直到视野出现模糊的影像。
5、然后调节细焦,再调节光照强度和聚光镜位置,使视野影像清晰,不刺眼。
需要强调说明:
1、上述步骤的粪便直检,这样就应该可以看到球虫卵囊了,如果确定看到球虫卵囊,可以说明的是这只兔子的粪便有球虫。
2、反之,如果没有看到球虫卵囊,却不能认定这就没有球虫,而可能是设备原因或者技术原因,或者偶然原因,可以多查几个标本。
3、关于粪便直检的可信度, 受以下几个方面的影响:
A:时间不够,通过前面的学习我们知道,从孢子化卵囊进入体内,到新卵囊随粪便排出大约需要7天以上,在这之前粪便里是不会带有虫卵的,也就是说,如果仔幼兔正处于7天潜伏期内就不会查到球虫,可靠的方法是过几天在做粪检。
B:粪检的准确率与卵囊排出的数量成正比,如果我们抽样的这粒兔粪正好卵囊个数少,抹的标本不均匀,可能会影响结果。
C:球虫卵囊随粪便排出有一个不准确的时间规律,有时候多,有时候少,不是每粒兔粪都是有相当多球虫卵囊的。
所以镜检球虫,应该多做几个标本。
兔粪直检的结果只能参考,不能作为决策依据。
兔粪直检球虫卵囊充其量只能定性,看到底有还是没有?不能定量,也就是说不知道到底球虫卵囊个数多还是少,危害程度有多大,是否需要用药治疗。
不能量化的问题在于,如果我们用药防治球虫,无法判断用药前后的数量变化,因此无法评价药物效果。
我们在后面的连载文章再一起讨论,球虫卵囊计数和辨认。
明天内容:综合防控。
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