关于牛血清白蛋白修饰超氧化物歧化酶，SOD的化学修饰以及修饰过程

今天小编整理并分享关于SOD的化学修饰以及牛血清白蛋白修饰超氧化物歧化酶的修饰过程：

修饰过程：

方法 :用戊二醛作为交联剂 ,用牛血清白蛋白 (BSA)将牛红细胞超氧化物歧化酶进行化学修饰 ,得到SOD的修饰酶.

修饰酶的制备：

将1mg soD 冻于粉(比活3300u/mg)溶于500pl 5mmolL,pH 7.0磷酸缓冲液中。准确称取2.5mg 牛血清白蛋白(BSA),溶于200pl 5mmol L, pH 7.0_磷酸缓冲液中。取250pul SOD(660Ou ml)与上述BSA溶液混合均匀。置于冰水浴中,缓慢加入10pl 25%的皮二醛水溶液,反应3h后,加入20mg 甘氨酸终止反应,然后加 3mg固体硼氢化钠,直至溶液由黄绿色变成无色。用SmmolL, pH 7.0的磷酸缓冲液在4℃透析24h,每8h换1次缓冲溶液,得到牛血清白蛋白修饰的SOD(修饰酶)。另取125ml SoD( 6600u/ml)加BSA 得到酶液(混合酶),其余125pulsOD放在Ep管作为对照(天然酶),4℃冰箱保存。

结果 :修饰酶等电点降低 ,对温度,pH的稳定性较天然酶有很大提高 ,对胰蛋白酶和胃蛋白酶也表现出很强的耐水解性.二价离子Mg2 + ,Mn2 + 对三种SOD活力均有不同程度的抑制作用 ,Ca2 + ,Zn2 + ,Cu2 + 对修饰酶活力有激活作用 ,一价离子K+ 对三种OSD活力均无明显影响。

结论 :修饰酶较天然酶的稳定性有很大的提高 ,加入Ca2 + ,Zn2 + ,Cu2 +可提高修饰酶的活力。

SOD的化学修饰方法：

PEGylation（聚乙二醇化）

共价修饰

金属离子配位

化学修饰基团的引入

生物素标记

固定化

超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）是一种重要的抗氧化酶，它在生物体内起到保护细胞免受氧自由基（包括超氧离子）损害的作用。化学修饰超氧化物歧化酶可以改变其活性、稳定性或特定的生物学性质，以用于不同的研究或应用领域。

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