A-431(人表皮癌细胞)培养攻略

　　细胞名称：A-431(人表皮癌细胞)

　　细胞别称：A431;A431/P

　　细胞货号：SNL-066

　　生长特性：贴壁

　　培养条件：DMEM+10%FBS+1%P/S

　　培养环境：空气，95%；二氧化碳(CO2)，5%；37℃

　　细胞简介：A-431源自一位患有表皮样癌的85岁女性表皮，是由D·J·Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A-431细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤快速增长的皮下肿瘤，在普通成纤维细胞饲养层和琼脂上形成克隆。A-431细胞是一个超三倍体人细胞株。A-431可用于3D细胞培养、高通量筛选、癌症研究、毒理学和免疫肿瘤学研究，也是一种合适的转染宿主。

  

　　A-431细胞培养注意事项

　　1、A-431细胞消化时间较长，具体时间因胰酶浓度、效价、消化条件有所不同，第一次对该细胞进行消化时要摸索最佳时间（具体步骤见后文）。传代时注意消化至细胞部分脱落后，先用胰酶将细胞都吹下来后再加入完培终止消化，避免细胞重新贴壁。

　　2、培养时黑点可能会比较多，为细胞代谢产物和细胞碎片，不影响细胞生长。若黑点较多可以通过PBS润洗或换液清除。如果黑点较多同时出现细胞变形、大量死亡或不生长的情况，应该考虑操作不当导致细胞受损或者存在支原体污染。

　　3、培养时存在部分漂浮的细胞是正常现象，不影响贴壁细胞生长。漂浮细胞较多时可通过换液去除。

　　4、细胞生长速度偏慢，注意控制接种密度不要过低。