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Kasumi-1(人急性原粒细胞白血病细胞)培养注意事项

细胞名称: Kasumi-1(人急性原粒细胞白血病细胞)

细胞别称: Kasumi-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1

细胞货号: SNL-339

生长特性: 悬浮

培养条件: 1640+20% FBS+1% P/S

培养环境: 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5%;37℃

细胞简介: Kasumi-1细胞从一名亚洲男性急性髓系白血病患者的外周血中分离出的成髓细胞,髓过氧化物酶阳性,显示其髓性成熟的形态。Kasumi-1细胞是一个带有8:21号染色体转位的白血病细胞株,这个转位使得AML1基因和ETO(或称MTG8)基因串联,使融合基因AML1-ETO(也称作AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的表达升高,因而细胞产生嵌合的AML1-ETO蛋白,这个蛋白下调CEBPA mRNA、蛋白和DNA的结合活性,而这种结合对粒性白细胞的分化是极端重要的。Kasumi-1细胞增殖实验显示,培养的Kasumi-1细胞对IL-3、IL-6、G-CSF(粒细胞集落刺激因子)、GM-CSF(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)有响应,但对IL-1和IL-5没有响应。在体外液体培养中分别加入二甲亚砜、G-CSF、IL-5,也没有观察到粒性或嗜酸性细胞的成熟。Kasumi-1细胞培养过程中,加入佛波酯可以诱导出的巨噬细胞样细胞。Kasumi-1细胞可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱研究、免疫学研究。


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Kasumi-1细胞培养注意事项

  • Kasumi-1细胞呈悬浮圆形生长或聚团生长。圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率。接种密度建议在50万细胞/mL左右为宜,密度过低或过高都可能造成细胞状态变差;培养至80万细胞/mL密度时即可传代,推荐传代比例1:2。培养时存在部分细胞碎片是正常现象, 若碎片比较多,可以待细胞密度较大时通过低速离心(900rpm,3min)去除部分碎片; 若碎片不多,则无需特殊处理;细胞密度低时不要离心去碎片,应该等细胞增殖到可以传代的密度再离心。Kasumi-1细胞生长速度较慢,需耐心培养。培养体系中血清含量为20%,不建议降低血清比例。生长环境保持稳定,少观察,少操作。当细胞状态较差时,不建议对细胞进行离心,需换液时可采用半换液法(详细步骤见下文)。Kasumi-1细胞冻存难度较大,建议使用高血清比例冻存液配方冻存细胞,冻存密度不可过低,推荐200-300万细胞/mL/管,以提高复苏活率。

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