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什么是密码子偏好性
密码子使用偏性是指各种生物体偏爱使用同义三联密码子(即编码相同氨基酸的密码子)的现象。
从生物学基础来看,不同的密码子使用密码子模式不同的形成可能与基因的GC含量有关。在一些单细胞生物如Escherichia coli、Saccharomyces cerevisiae中,高表达的基因密码子的使用偏性一般比较大。这些偏好可能与两个原因有关:一是避免使用类似终止密码子的密码子;二是这些偏好能够有效地翻译密码子,因为这些密码子对应于生物体中非常丰富的tRNA。无论导致这种偏好的原因到底是什么,不同生物的密码子使用偏性的差异可以非常大。真实的外显子一般能反映出这些偏好,而随机选择的三联体序列却不能。
密码子偏好性图常见于叶绿体基因组中出现
NO.1
计算RSCU值
需要先用pip安装CAI
from CAI import RSCU
from Bio import SeqIO
c2aa = {
'TGT':'Cys',
'UGU':'Cys',
'TGC':'Cys',
'UGC':'Cys',
'GAT':'Asp',
'GAU':'Asp',
'GAC':'Asp',
'GAC':'Asp',
'TCT':'Ser',
'UCU':'Ser',
'TCG':'Ser',
'UCG':'Ser',
'TCA':'Ser',
'UCA':'Ser',
'TCC':'Ser',
'UCC':'Ser',
'AGC':'Ser',
'AGC':'Ser',
'AGT':'Ser',
'AGU':'Ser',
'CAA':'Gln',
'CAA':'Gln',
'CAG':'Gln',
'CAG':'Gln',
'ATG':'Met',
'AUG':'Met',
'AAC':'Asn',
'AAC':'Asn',
'AAT':'Asn',
'AAU':'Asn',
'CCT':'Pro',
'CCU':'Pro',
'CCG':'Pro',
'CCG':'Pro',
'CCA':'Pro',
'CCA':'Pro',
'CCC':'Pro',
'CCC':'Pro',
'AAG':'Lys',
'AAG':'Lys',
'AAA':'Lys',
'AAA':'Lys',
'ACC':'Thr',
'ACC':'Thr',
'ACA':'Thr',
'ACA':'Thr',
'ACG':'Thr',
'ACG':'Thr',
'ACT':'Thr',
'ACU':'Thr',
'TTT':'Phe',
'UUU':'Phe',
'TTC':'Phe',
'UUC':'Phe',
'GCA':'Ala',
'GCA':'Ala',
'GCC':'Ala',
'GCC':'Ala',
'GCG':'Ala',
'GCG':'Ala',
'GCT':'Ala',
'GCU':'Ala',
'GGT':'Gly',
'GGU':'Gly',
'GGG':'Gly',
'GGG':'Gly',
'GGA':'Gly',
'GGA':'Gly',
'GGC':'Gly',
'GGC':'Gly',
'ATC':'Ile',
'AUC':'Ile',
'ATA':'Ile',
'AUA':'Ile',
'ATT':'Ile',
'AUU':'Ile',
'TTA':'Leu',
'UUA':'Leu',
'TTG':'Leu',
'UUG':'Leu',
'CTC':'Leu',
'CUC':'Leu',
'CTT':'Leu',
'CUU':'Leu',
'CTG':'Leu',
'CUG':'Leu',
'CTA':'Leu',
'CUA':'Leu',
'CAT':'HIS',
'CAU':'HIS',
'CAC':'HIS',
'CAC':'HIS',
'CGA':'Arg',
'CGA':'Arg',
'CGC':'Arg',
'CGC':'Arg',
'CGG':'Arg',
'CGG':'Arg',
'CGT':'Arg',
'CGU':'Arg',
'AGG':'Arg',
'AGG':'Arg',
'AGA':'Arg',
'AGA':'Arg',
'TGG':'Trp',
'UGG':'Trp',
'GTA':'Val',
'GUA':'Val',
'GTC':'Val',
'GUC':'Val',
'GTG':'Val',
'GUG':'Val',
'GTT':'Val',
'GUU':'Val',
'GAG':'Glu',
'GAG':'Glu',
'GAA':'Glu',
'GAA':'Glu',
'TAT':'Tyr',
'UAU':'Tyr',
'TAC':'Tyr',
'UAC':'Tyr',
}
seqs = [rec.seq for rec in SeqIO.parse('data.fasta','fasta')]
rscu = RSCU(seqs)
fw = open('rscu.txt','w')
amino_acid = {}
for aa,bb in rscu.items():
if c2aa[aa] not in amino_acid:
amino_acid[c2aa[aa]] = 6
else:
amino_acid[c2aa[aa]] -= 0.5
print(aa,c2aa[aa],round(bb,3),amino_acid[c2aa[aa]])
fw.write(aa+","+c2aa[aa]+","+str(round(bb,3))+","+str(amino_acid[c2aa[aa]])+"\n")
fw.close()
把上述代码复制保存为RSCU.py,利用上述的Python脚本计算RSCU值,代码命令是python RSCU.py,得到一个rscu.txt文件。
注意:序列文件名字是data.fasta,改成一致即可。
CAI安装:pip install CAI
NO.2
利用R绘制密码子偏好性堆积图
需要安装ggplot2和aplot包
install.packages('aplot')
library(ggplot2)
library(aplot)
#rscu.txt通过python RSCU.py得到
df<-read.csv('rscu.txt',header=F,stringsAsFactors = F)
p1<-ggplot(df,aes(fill=as.character(V4),x=V2,y=V3))+
geom_bar(position = "stack",stat="identity")+
theme_bw()+scale_y_continuous(expand=c(0,0),
limits = c(0,6.2))+
theme(legend.position = "none")+labs(y="RSCU",x="")
#geom_text(aes(label=V1),position=position_stack(vjust=0.5))
pdf('rscu.pdf')
p1
p2<-ggplot(df,aes(x=V2,y=V4))+
geom_label(aes(label=V1,fill=as.character(V4)),
size=2)+
labs(x="",y="")+ylim(3.4,6.1)+
theme_minimal()+
theme(legend.position = "none",
axis.text = element_blank(),
axis.ticks = element_blank(),
panel.grid = element_blank())
p1%>%
insert_bottom(p2,height = 0.3)
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