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影响抗原抗体反应的因素很多,主要有两个方面:一是抗原抗体本身 的因素;另一方面是反应环境因素。
一、反应物自身因素
抗原抗体反应中,抗原和抗体是反应的主体,所以它们的特性直接影 响其结合情况。
(一)抗原
抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体 反应的结果。
(二)抗体
抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面: (1)来源:不同动物来源的免疫血清,其反应性存在差异。如家兔等大 多数动物的免疫血清,由于具有较宽的等价带,与相应抗原结合易出现可 见的抗原抗体复合物。马、人的免疫血清等价带窄,抗原不足或过剩,均 易形成可溶性复合物。而单克隆抗体一般不用于沉淀或凝集反应。
(2)浓度:抗体的浓度是相对于抗原而言的,二者浓度合适时才易出现 可见的反应结果,所以在试验前应先进行预试验,滴定抗原抗体最佳反应 浓度。
(3)特异性与亲合力:特异性与亲合力是影响抗原抗体反应的关键因 素,它们共同影响试验结果的准确度。试验试剂应尽可能选择高特异性、 高亲合力的抗体,以保证试验的可靠性。
二、环境条件
(一)电解质
抗原与抗体发生结合后,由亲水胶体变为疏水胶体的过程中须有电解 质参与才能进一步使抗原抗体复合物表面失去电荷,水化层破坏,复合物 相互靠拢聚集,形成大块的凝集或沉淀。若无电解质参加,则不出现可见 反应。为了促使沉淀物或凝集物的形成,常用 O.85%氯化钠或各种缓冲液 作抗原及抗体的稀释液及反应液。但电解质的浓度不宜过高,否则会出现 盐析现象。
(二)酸碱度
蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体 反应必须在合适的 pH 环境中进行,pH 过高或过低都将影响抗原与抗体的理 化性质。抗原抗体反应一般在 pH 为 6~9 进行。
(三)温度
抗原抗体反应必须在合适的温度中进行,一般以 15~40℃为宜,最适 反应温度为 37℃。某些特殊的抗原抗体反应,对温度有 一些特殊的要求,例如冷凝集素在 4℃左右与红细胞结合最好,20℃以上反 而解离。
此外,适当振荡和搅拌也能促进抗原抗体分子的接触,加速反应,其 作用与反应物粒子大小成正比。
第四节 抗原抗体反应的类型
随着免疫学技术的飞速发展,在原有经典免疫学实验方法的基础上, 新的免疫学测定方法不断出现,使免疫学实验技术更特异、更敏感和更稳 定。目前根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别,抗原抗体反应出 现的现象和结果不同,以及反应时参与的其他条件不同,可将抗原抗体反 应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应 (agglutination);②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应 (precipitation);③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应 (cytolysis),细菌抗原表现为溶菌反应,红细胞抗原表现为溶血反应;④ 细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应;⑤免疫标记的抗原抗 体反应等。
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