在检测过程中,将PPI探针与细胞或组织样本中的蛋白质混合,亲和标签与目标蛋白质特异性结合,蛋白质亲和标签与亲和标签相互作用,从而形成蛋白质-亲和标签-蛋白质亲和标签的三元复合物。通过检测检测标签的信号强度和分布,可以分析目标蛋白质的表达水平和定位,以及与其他蛋白质的相互作用。
PPI探针可以是多种类型的工具或技术,其中一些常见的包括:
蛋白质亲和纯化:利用特定蛋白质与其它蛋白质之间的相互作用,通过亲和纯化的方法分离并检测相互作用蛋白。
酵母双杂交(Yeast Two-Hybrid):一种常用的实验技术,用于检测和分析蛋白质间的相互作用,利用酵母细胞中的转录因子结合域和激活域的相互作用来指示蛋白质相互作用。
质谱法(Mass Spectrometry):通过检测蛋白质之间的相互作用,识别和分析蛋白质复合物的成分。
表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,SPR):一种实验技术,通过监测生物分子在金属表面的共振现象来研究蛋白质相互作用。
荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET):利用荧光蛋白质或荧光染料间的能量转移来检测蛋白质之间的距离和相互作用。
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以上资料来自昊然小编MSQ.2023.12.7
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