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植物体细胞杂交

植物体细胞杂交是在原生质体培养技术的基础上,借用动物细胞融合   植物体细胞杂交的过程包括原生质体的制备,原生质体融合的诱导,杂种细胞的筛选和培养,以及杂种植株的再生与鉴定等环节。下面以烟草和大豆的体细胞杂交为例,简要介绍植物体细胞杂交的过程。

原生质体制备选取烟草植株上的幼嫩叶片和培养好的大豆细胞,用酶解法制备原生质体。烟草的原生质体呈绿色,大豆的无色,在显微镜下很容易将二者区别开来。

原生质体融合取等量的烟草和大豆的原生质体混合后,加入聚乙二醇溶液。在显微镜下观察,可以看到原生质体相互黏集在一起。隔一段时间后,加入高钙、高pH的溶液,这时原生质体才开始融合。原生质体融合包括膜融合和核融合两个过程。诱导融合只能诱导细胞膜的融合,两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的。融合后的杂种细胞的异核体,多数情况下在第一次有丝分裂期即发生两个亲本核的融合,如果两个核在杂种细胞中位置较近,也可能在有丝分裂前就发生融合。

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