限制酶切割及电泳的题目

1.现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图l。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是 （     ）

解析：由于分子共3000bp，所以用酶H单独酶切，结果得1000bp和2000bp，说明酶H只有一个切点。用酶B单独酶切，结果得400bp、600bp、2000bp，共3000bp，说明酶B有两个切点。用酶H和1酶B同时酶切，结果得400bp、600bp、1400bp三种，400+600+1400=2400bp，而该DNA分子有3000bp，所以可能还有一个600bp。对照条件，图A符合要求。图B中用酶B单独切结果为400bp、600bp、1400bp，与题不符；图C中用酶B单独切结果为400bp、1200bp、1400bp，与题不符；图D酶H有两个切点，酶B只有一个切点，与题不符。

答案：A

2.在DNA 测序工作中，需要将某些限制性内切酶的限制位点在 DNA上定位，使其成为 DNA 分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶 HindⅢ，BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个 4kb（1kb即1千个碱基对）大小的线性DNA 分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如下图所示。 

 据此构建这两种限制性内切酶在该DNA分子上的“限制酶图谱”如乙图，请判断正确的标示是（    ）

A.  2.8         B.  Hind Ⅲ        C.   0.3      D.    BamHⅠ

解析：注意图中的数字表示的是长度。也就是说，在电泳时，1.2kb长度的连出现在1.2kb数字位置，2.8kb长度的连出现在2.8kb数字位置，即这条链被切成两段，分别是1.2kb和2.8kb.

答案：C

 

3.现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是的（   

答案：D

 

4.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是（    ）

A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

 

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5.细菌蛋白质在极端环境条件下可通过肽链之间的二硫键维持稳定。已知不同的多肽产物可因分子量不同而以电泳方式分离。下列左图是一个分析细菌蛋白的电泳结果图，“-”代表没加还原剂，“+”代表加有还原剂，还原剂可打断二硫键，“M”代表已知分子量的蛋白质，右侧数字代表蛋白质或多肽的相对分子量。根据左侧结果，下列哪个图案最能代表该细菌原本的多肽结构（注意：“一”代表二硫键）（    ）

解析：本题是有关多肽结构的判断。从左图可以看出该多肽的分子量大约是130，打断二硫键后的片段中，较小的片段分子量大约是30，较大的片段分子量大约是70。由此可以判断打断二硫键后的片段中有两个较小的片段、一个较大的片段，所以选项B是正确的。

答案B