胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)是引起草莓炭疽病的病原之一,严重危害草莓的生产。土传病害的发生与土壤中病原菌含量密切相关,为达到提前了解作物种植前土壤中病原菌含量,提前制定综合防治措施,降低经济损失的目的,本研究针对胶孢炭疽菌构建了实时荧光定量qPCR检测体系,以胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)为研究对象,利用胶孢炭疽菌特异性引物对和TaqMan探针,采用Roche LightCycler?480Ⅱ定量检测系统,用克隆有靶标片段的重组质粒为模板构建了绝对定量标准曲线,其扩增效率为102.00%(R~2=0.980 2),检测灵敏度为50 copies每反应体系,建立了土壤中胶孢炭疽菌的高效率、高特异性、高灵敏度的定量检测体系。应用该检测技术,以草莓为指示作物,通过在土壤中定量添加胶孢炭疽菌孢子开展温室盆栽试验,研究土壤中胶孢炭疽菌含量与草莓炭疽病发生的关系。结果表明,当土壤中孢子浓度大于或等于10~4个孢子/g时,草莓炭疽病发生,且随着土壤中病原菌接种量的增加,病害发生严重,病情指数增加,土壤中孢子达到10~6个孢子/g时,草莓炭疽病发病率100%。进一步将采集河北省草莓种植区田间土壤样品进行检测,结合病害调查,以期明确土壤中病原菌含量与草莓炭疽病发生之间的关系。
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