在格拉尼库斯河战役大胜后，亚历山大率军解放了小亚细亚，然后从地中海东岸的伊苏湾南下攻打叙利亚，另一方面波斯帝国的大流士三世组织了一支庞大军队，进驻叙利亚东北的索契。
之前腓力二世在组织希腊攻打波斯时，曾考虑组建海军应对波斯海军，所以他跟希腊同盟关系比较缓和特别是雅典，目的就是利用雅典的海上军事力量牵制波斯海军。而亚历山大并没有重视海军的建设，相反他的目的则是攻占地中海沿岸港口，迫使地中海的波斯舰队无用武之地。所以亚历山大的进军路线，就是延小亚细亚至叙利亚至埃及，逐步攻占波斯港口。
（伊苏斯战役-亚历山大军队攻下沿岸关隘，波斯军队绕到亚历山大后方，形成北面是波斯军，南面是亚历山大军。）
公元前333年伊苏斯战役爆发。原本波斯军队面对亚历山大的远征打算采取守势，就是驻守索契。但亚历山大军队并没有去正面攻打索契，相反亚历山大军队一直延海岸南下，这期间由帕曼纽逐个攻克叙利亚的关隘。这使得大流士在索契等得不耐烦，于是绕到亚历山大军队的后方，攻占了伊苏斯并让亚历山大的逃兵去报信。于是亚历山大不得不率军北上与波斯军队正面对峙。
（波斯军队由于左面是山地难以布置，于是半包围亚历山大军。亚历山大分兵防守右侧，右翼是亚历山大，左翼是帕曼纽）
于是两军又是延河岸对峙，波斯军队10万（也有说10-25万），亚历山大军队6万。波斯军队大流士把主要的骑兵布置在右翼，由于左面是山地骑兵难以行动，然后把波斯步兵和希腊雇佣兵置于左翼，也由于军队众多和山地原因，左翼形成延伸半包围阵型。亚历山把马其顿骑兵和尼卡诺尔率领的持盾卫队置于右翼，由于担心左翼的希腊同盟军抵挡不了波斯骑兵，因而把色萨利骑兵调往左翼。另外分一部分兵力抵挡波斯的半包围阵型。
（亚历山大右翼的马其顿骑兵撕开波斯的步兵，而左翼帕曼纽率领的马其顿长枪方阵则抵挡波斯骑兵）
战役开始后，首先是亚历山大率军率先突击，他先让持盾卫队抵挡了波斯的弓箭攻击，然后率骑兵突击波斯的步兵阵营，但由于马其顿右翼过于靠前导致中间形成两翼之间的缺口。波斯的希腊雇佣兵以此为契机猛攻马其顿中央阵营，另一方面波斯的骑兵也突击攻打马其顿的左翼。不过亚历山大还是先一步攻溃了波斯的左翼，帕曼纽的马其顿方阵也抵挡住了攻击。 （基本上两军对阵都是左右骑兵对步兵，亚历山大的马其顿军队训练有素，加上骑兵比较强悍，另一方面便是马其顿长枪方阵克制了敌方的骑兵，这个是亚历山大军屡败波斯军队的两军差别的原因。最为重要的是亚历山大率领的骑兵敢于突击敌军阵型，这也是这场胜利的关键，要不然这场战役也没多少战术含量。）于是马其顿军队撕裂波斯的左翼，而后包围波斯中央的希腊雇佣兵，进而大流士三世大败溃逃。
在伊苏斯战役亚历山大率军以少胜多，大败两倍于己的波斯军队。可以说是继马拉松战役、普拉提亚战役后希腊军队的又一场以少胜多的战役。
此战后帕曼纽率军进击攻克叙利亚地区波斯帝国的大马革士。之后亚历山大率军继续延地中海南下，攻克腓尼基的岛城泰尔，在历时半年的泰尔围城战之后，亚历山大再继续南下攻打腓尼基的推罗城，同样历时半年的推罗围城战。这段时间大流士三世派人来请和，但亚历山大拒绝了大流士的请和。
公元332年，亚历山大率军以解放者姿态抵达埃及，埃及很快就投降了。在这段时间亚历山大做了短暂的停留，并且追溢为埃及的法老王，修建了亚历山大港。
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