天麻用蜜环菌的培养

1．纯菌种的分离 天麻所用蜜环菌的菌种可以从子实体经孢子分离、从菌索经组织分离以及培育大麻、猪苓和天麻的旧菌材或野生蜜环菌获得。在此仅介绍从菌索分离的方法。 培养基：

1．纯菌种的分离 天麻所用蜜环菌的菌种可以从子实体经孢子分离、从菌索经组织分离以及培育大麻、猪苓和天麻的旧菌材或野生蜜环菌获得。在此仅介绍从菌索分离的方法。

培养基：①麦芽糖2.5克，蛋白胨、琼脂2克，20％大麦芽煮汁成100毫升，pH5～6.5；②去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁1.5克，维生素B110毫克，水100毫升，pH5～6.5。

任选上述两种培养基中的一种。配好后在121℃下灭菌半小时，摆成斜面。选幼嫩而健壮的野生蜜环菌菌索切取尖端，用70％的酒精进行表面消毒5分钟，在无菌条件下，去掉皮鞘，取白色菌髓部分，切成长1厘米左右的小段接入试管斜面培养基上，每管取一段即可，在20～25℃的条件下培养，15天左右，蜜环菌菌丝就可以长满斜面。如果严格按无菌要求操作，就可以得到纯蜜环菌的母种。如果有杂菌污染，应及时转接。转接时要注意不要将转接的蜜环菌菌丝污染上杂菌。经几次转接纯化，就可以得到纯的蜜环菌母种。

2．蜜环菌原种的培养（2级菌种） 培养基：①木屑60％，麦麸35％，石膏粉1％，米糖4％，含水量60％，pH5～6.5；②麦麸50％，米糖20％，木屑29％，石膏粉1％，含水量55％，pH5～6.5。任选上述两种培养基配方中的一种，按量均匀混合后，装入广口瓶或塑料袋中压实，中间用木棍插一直径约2厘米的洞，包扎好后，常规灭菌。接种与培养：灭菌冷却后的培养基就可以用来接种，按无菌要求将试管斜面的蜜环菌菌丝转接到广口瓶培养基的洞中间，用培养基盖好，包扎好后20～25℃条件下培养，约2个月，菌丝可布满全瓶。通常，一试管斜面可转接8～10瓶原种培养基。如果操作不熟练，每瓶在原种培养基中可以多转接一些母种菌丝，甚至1瓶母种转接1瓶原种都可。

3．栽培种的培养 培养基：①杂木屑93％，玉米粉（或麦麸）5％，过磷酸钙2％，含水量70％。②栎树或其他阔叶树树叶与杂木屑各50％，含水量65％；③杂木枝条或段木片（直径1厘米左右）100％。用水泡透。任选上述3种培养基中的一种或原种培养基，混匀拌好，包扎，常规灭菌。按无菌要求，接入蜜环菌原种。20～25℃下培养，菌丝长满全瓶即可（约2个月）。每瓶原种可转接栽培种40瓶左右。

4．天麻菌材和苗床的培养 ①时间，春季气温12℃以上时（为4～5月份栽培猪苓准备）（10-5月份栽培天麻）或6～7月（为8～10月栽培猪苓准备）（5-7月栽培天麻箭麻培育天麻种子）。②备料，选木质坚硬的阔叶树，如栎树、枫树、桦树、桑树、柳树、板栗等，直径10厘米左右，长60厘米左右。在段木的3～4面每隔4厘米左右砍一深达木质部的鲜鳞口备用。③栽培菌材和菌床，菌材和菌床的培养方法类似天麻栽培中蜜环菌菌材和菌床的培养方法，读者可以参考天麻栽培技术中相应的部分。